세균 배양 : 유형, 특성, 방법, 요구 사항 - 생물학 - 2025

박테리아 문화는 액체 매체에서 고체 배지에서 세균 식민지의 모양과 혼탁의 결과로,이를 재생하기 위해서는, 영양 미디어에서 이러한 미생물의 접종의 결과이다.

파종 방법은 존재하는 박테리아가 분산되고 적절하게 분리 된 콜로니를 개발할 수있는 방식으로 접종 물을 분배 할 수있는 매우 중요합니다.

저자가 카라 보보 대학의 생물 의학 및 기술 과학 빌딩의 세균학 실험실에 심은 다양한 작물. 출처 : 저자 MSc가 찍은 사진 구성. Marielsa Gil.

고체 배양 배지에서 얻은 콜로니는 파종 된 미생물의 증식의 결과입니다. 각 집락은 단일 박테리아에서 시작하여 기하 급수적으로 증식하여 거시적으로 보이는 개체군을 형성 할 수 있습니다.

액체 배양 배지에서도 마찬가지이지만이 경우 세균 성장은 탁도에 의해 관찰됩니다.

선택한 배양 배지가 특정 박테리아의 발달에 필요한 영양 및 pH 조건을 충족하면 박테리아 성장이 가능합니다. 또한 온도, 배양 시간, 산소 농도, CO ₂ 등과 같은 다른 변수를 제어 할 필요가 있습니다.

모든 박테리아 집단이 동일한 요구 사항을 필요로하는 것은 아니지만, 배지에 펩톤이 포함되어있는 것과 같이 일부는 거의 모든 사람에게 공통적 일 수 있지만, 성장 인자라고하는 다른 특정 물질을 추가로 요구하는 더 까다로운 미생물이 있다는 것도 사실입니다.

예를 들어, 일부 헤모필루스가 성장하려면 인자 X (헤민)와 인자 V (NAD)의 존재가 필요하다고 언급 할 수 있습니다.

세균 배양의 유형

세균 배양은 다중 미생물, 순수 또는 혼합 일 수 있습니다.

다중 미생물 세균 배양

다중 미생물 배양은 특정 병원체도 발견 될 수있는 정상적인 미생물 군이있는 곳에서 얻은 샘플을 파종하여 얻은 것입니다.

예 : 인후 면봉 배양을 개발할 때 Streptococcus pyogenes와 같은 병원균이 발견 될 수 있지만 해당 지역에 일반적인 미생물 총이 동반됩니다.

이 경우, 격리 된 상태로 존재하는 여러 종류의 박테리아가 성장할 수 있도록 좋은 줄무늬가 필수적입니다.

Streptococcus pyogenes 균주와 호환되는 특성을 가진 콜로니를 백금 루프로 조심스럽게 만진 다음 처녀 배양 배지에 심어 해당 미생물의 순수한 배양 물을 얻습니다.

이 순수 배양에서 박테리아를 식별하는 데 필요한 모든 테스트를 수행 할 수 있습니다.

순수 세균 배양

미생물을 효율적으로 식별하려면 순수 배양에서 작업해야합니다.

다중 미생물 배양의 분리 된 콜로니를 재배치하여 이전 예의 경우와 같이 순수한 배양 물을 얻을 수 있습니다. 박테리아 유형). 예 : 세균성 수막염 환자로부터 CSF를 접종 한 경우.

또 다른 방법은 새로운 순수 문화를 얻기 위해 오래된 순수 문화에서 다시 씨를 뿌릴 때입니다.

혼합 세균 배양

이러한 문화는 자연에서 발생하는 미생물의 혼합물로 구성됩니다. 일부 산업 공정에서는 혼합 문화를 사용하는 것이 편리합니다.

박테리아 상호 관계를 연구 할 수 있기 때문에 여러 순수 문화의 결합을 통해 얻을 수 있습니다.

예를 들어, 산업 폐수에서 이종 생물학의 분해에 유용합니다. 생분해 성 물질로 작용하기 때문입니다.

세균 배양의 특성

박테리아 배양에서 얻은 콜로니의 형태 학적 특성은 매우 다양 할 수 있습니다.

콜로니는 매우 작거나, 보통이거나, 클 수 있으며 건조하거나 점액질, 윤기 있거나 둔한 것처럼 보일 수 있습니다. 질감에 따라 매끄 럽거나 거칠게 변할 수 있으며 모양에 따라 원형, 평평, 볼록형이 될 수 있습니다.

색상에 따라 무색, 흰색, 노란색, 분홍색, 자홍색, 빨간색, 주황색, 베이지 색, 회색, 녹색, 갈색, 검은 색 또는 금속 광택이있을 수 있으며 관련 박테리아와 사용 된 배양 배지에 따라 다릅니다.

식민지의 경계는 규칙적이거나 불규칙 할 수 있습니다. 반면에 다른 사람들은 "swarming"이라고 불리는 거의 전체 매체에 분포 된 균일 한 필름을 제공 할 수 있습니다. 이것은 Proteus sp.

일부 세균 배양은 관련된 종의 특징적인 냄새를 방출합니다. 예를 들어, 녹농균 (Pseudomonas aeruginosa)의 배양은 특유의 과일 냄새가 나는 반면 Proteus 속은 특유의 부패한 냄새가납니다.

크기에 따른 식민지의 예

매우 작음 : Mycoplasma pneumoniae, Francisella tularensis.

소형 : Streptococcus sp, Enterococcus sp.

보통 : 장내 세균과

크게 : Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa.

외관에 따른 식민지의 예

건조 : 락토 바실러스 컨퓨 서스.

점액 성 : Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

Brilliant : Klebsiella pneumoniae.

불투명 : Enterococcus faecalis, Neisseria gonorrhoeae의 일부 균주.

질감에 따른 식민지의 예

매끄러운 집락 : Micrococcus luteus

거친 집락 : 영양 한천의 Sarcina ventriculi.

모양에 따른 식민지의 예

원형 : 영양 한천에있는 Listeria murrayi 및 Micrococcus luteus.

Flat : 영양 한천에 Staphylococcus equorum.

볼록 : 황색 포도상 구균, Klebsiella pneumoniae.

국경에 따른 식민지의 예

둥근 모서리 : 황색 포도상 구균, 대장균.

불규칙한 경계 : Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

잎이있는 가장자리 : Bacillus sp.

색상에 따른 식민지의 예

투명 또는 무색 : XLD 한천의 Shigella sp.

흰색 : 혈액 한천의 포도상 구균 호미 니스.

베이지 색 : Bacillus sphaericus 및 Lactobacillus는 영양 한천에 혼동됩니다.

노란색 : 혈액 한천의 황색 포도상 구균 및 Elizabethkingia meningoseptica, Pediococcus sp, 영양 한천의 Staphylococcus lentus,

분홍색 : XLD 한천에 대장균, 영양 한천에 Micrococcus roseus.

자홍색 : Mac Conkey 한천의 Escherichia coli.

바이올렛 : 크로 모 박테 리움 violaceum.

붉은 색 : 상온에서 영양 한천에 Serratia marcescens.

주황색 : 영양 한천에 Kurthia zopfii.

회색 빛 : 토양 추출물 한천의 Sporosarcina ureae.

초록색 : BHI 한천의 녹농균 (Pseudomonas aeruginosa).

갈색 : 담즙 에스 쿨린 한천의 Enterococcus sp.

검은 색 : SS 한천의 Salmonella enteritidis.

금속 광택 : 엔도 한천에 대장균.

세균 배양 방법

통성 호기성 또는 혐기성 세균 배양

가장 널리 사용되는 재배 방법입니다. 이것은 우선 인간에게 병원 성인 대부분의 박테리아가 호기성 또는 통성 혐기성이라는 사실 때문입니다. 둘째, 혐기성 문화보다 훨씬 저렴하고 쉽습니다. 예 : 각각 Mycoplasma pneumoniae 및 Escherichia coli.

혐기성 세균 배양

이러한 유형의 배양에는 완전한 산소 억제가 필요합니다. 혐기성 세균 배양 배지는 일반적으로 공기 중에 포함 된 산소의 독성 효과를 제거하기 위해 아스코르브 산, 티오 글리콜 레이트, 시스테인 또는 황과 같은 환원 물질을 포함해야합니다.

일부는 산소가 있으면 파란색이고 혐기성 균증에서는 무색 인 resazurin과 같은 지표를 포함합니다. 예 : Clostridium tetani.

microaerophilia의 세균 배양

배양 플레이트는 불이 켜진 양초가있는 미세 호기성 후드에 배치됩니다. 양초는 산소를 소비하고 꺼집니다. 이 상태에서 Streptococcus sp.와 같은 일부 박테리아가 자랍니다.

재료 및 요구 사항

기재

박테리아 배양을 수행하는 데 필요한 재료는 다음과 같습니다. 배양 배지 또는 수프가있는 배양 접시 또는 튜브, 백금 루프, 샘플, 분젠 버너 또는 오븐.

박테리아 배양을 수행하기위한 요구 사항

박테리아의 배양에는 배지의 영양소, pH, 온도, 산소 농도, CO2, 습도 등과 같이 고려해야 할 많은 요소가 필요합니다.

영양소

세균 배양에는 거대 요소와 미량 요소를 포함하는 배양 배지가 필요합니다. 거대 원소 중에는 펩톤, 아미노산, 탄소 및 질소 공급 원인 탄수화물과 같은 유기 물질이 언급 될 수 있습니다.

미량 원소 중에는 무기 물질 또는 미량 원소 망간, 아연, 니켈, 붕소, 염소, 셀레늄, 실리콘, 코발트, 구리 등이 있습니다.

수소 이온 농도 (pH)

수소 이온 (H 농도 ⁺ ) 및 수산 이온 (OH ^- ) 등이 개발 될 문화가 매우 중요하다 배지는 pH를 결정한다.

가장 일반적으로 사용되는 pH는 중성 (pH = 7.0)이지만 산성 또는 알칼리성 pH가 편리한 수단이있을 수 있습니다 (예 : 각각 호 산성 또는 알칼리성 박테리아를 분리하려는 경우).

온도

온도는 세균 배양의 성장에 영향을 미치는 매우 중요한 요소입니다. 박테리아는 호 열성 (<20 ° C 온도에서 성장, 중온 성 (20 ° C ~ 42 ° C 사이), 고온 성 (40 ° C ~ 70 ° C), 고 열성 (70 ° C ~ 105 ° C)) 일 수 있습니다.

산소 요구 사항

호기성 : 산소가있을 때 자랍니다.

Microaerophilic : 5-10 % CO2의 존재 하에서 자랍니다 _.

엄격한 혐기성 세균 : 산소가 없을 때 자랍니다.

통성 혐기성 미생물 : 산소가 있거나없는 상태에서 자랍니다.

Aerotolerant : 그들은 산소없이 잘 자라고 산소를 거의 견디지 못합니다.

문화 미디어

배양 배지는 미생물 성장 또는 배양을 위해 실험실에서 준비되는 특수 영양 제제입니다. 이러한 매체는 일관성, 구성 및 기능이 다양합니다. 각 실험실은 필요에 맞는 배양 배지 유형을 준비합니다.

세균 배양 수집

임상, 환경 또는 산업적으로 중요한 박테리아 균주의 수집, 특성화, 유지 및 배포에 전념하는 기관 또는 조직이 있습니다.

이 균주는 연구 작업 및 배양 배지에서 품질 관리를 수행하는 데 사용됩니다.

예 : 균주 American Type Culture Collection, Venezuelan Center for Collection of Microorganisms (CVCM) 및 National Institute of Hygiene, Epidemiology and Microbiology of Cuba (INHEM) 균주 등이 있습니다.

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