혈액 도말 : 특성, 유형, 기술 및 조직학 - 생물학 - 2025

혈액 도말 A는 말초 혈 도말 혈액 순환에서 존재하는 성분을 분석하기 위해 사용된다. 혈액 도말 관찰은 많은 병리의 진단 및 추적에 매우 유용한 혈액 학적 데이터를 제공합니다.

혈액 도말 검사를 통해 다양한 유형의 백혈구 (백혈구 공식)의 수를 정량화 할 수있을뿐만 아니라 적혈구, 백혈구 및 혈소판의 형태와 모양을 분석 할 수 있습니다.

혈액 도말 준비. 출처 : 실험실 유리의 피. Public DomainPictures.net

백혈구 증가증 또는 백혈구 감소증, 림프구 증가증 또는 림프구 감소증, 호중구 또는 호중구 감소증, 혈소판 감소증 또는 혈소판 감소증 및 호산구 증가증과 같은 세포 수의 이상을 감지 할 수 있습니다. 세포 크기 및 모양 이상도 볼 수 있습니다.

또한 다양한 유형의 빈혈, 백혈병 및 세균 또는 혈액 기생충 감염을 감지 할 수 있습니다.

이를 위해 연구 목적에 따라 수행되는 다양한 유형의 도말이 있습니다. 얇은 얼룩과 두꺼운 얼룩이 있습니다. 이러한 얼룩은 실행 기술과 연구 목적이 다릅니다.

미세한 방울이있는 것은 혈액학을 완료하기위한 보조제로 사용됩니다. 이는 혈액을 구성하는 세 가지 세포 계열 (적색 계열, 흰색 계열 및 혈소판)의 모양과 형태에 대한 분석 외에도 백혈구 공식에 대한 데이터를 제공합니다. 그들은 또한 두꺼운 혈액 필름 연구를 보완하는 역할을하지만.

후막은 말라리아 나 말라리아, 톡소 플라스마 증, 리슈 마니아 증, 샤 가스 병, 아기자기 증 및 마이크로 필라 리아 증과 같은 혈액 기생충으로 인한 질병의 진단에 사용됩니다.

혈액 도말의 특성

좋은 혈액 도말은 특정 특성을 충족해야합니다. 그중에서 다음과 같이 언급 할 수 있습니다.

-샘플이 대표가 되려면 최소 품질 요구 사항을 충족해야합니다.

-샘플링은 잘 실행되어야합니다.

-번짐의 적시 실행.

-정맥혈로 시행하는 경우 세포를 변형하지 않는 항응고제를 사용하고 튜브를 혼합 한 후 도말을합니다.

-모세 혈로 행해진 경우 첫 방울을 버립니다.

-스프레드는 균질해야합니다. 이를 통해 세포가 고르게 분포되고 혈액 세포의 모양과 수를 잘 분석 할 수 있습니다.

-스미어의 측면은 처음부터 끝까지 매끄 럽습니다.

-번짐은 슬라이드 측면에서 1 ~ 2mm의 여백을 유지해야합니다.

-스미어 레이어는 처음부터 끝까지 점차적으로 두께가 감소해야합니다 (슬라이드 방식으로 미세한 드롭으로 번짐).

-샘플 혼동을 피하기 위해 적절한 라벨을 부착해야합니다.

-혈액 성분의 명확한 관찰을 위해 적절하게 수정하고 염색하십시오.

-현미경으로 준비물을 장착하기 전에 얼룩을 아주 잘 말리십시오. 젖은 얼룩에 침지 오일을두면 세포가 보이지 않는 미셀이 형성됩니다.

혈액 도말 유형

말초 혈액 도말은 얇은 도말과 두꺼운 도말로 분류 할 수 있습니다. 얇은 층을 가진 것은 백혈구 공식 연구 및 혈액 세포의 형태 학적 관찰에 사용됩니다. 보렐리 아와 같은 세포 외 박테리아와 플라 스모 듐과 같은 세포 내 혈액 기생충도 볼 수 있습니다.

미세 얼룩에서는 기생충의 종을 식별 할 수 있으므로 두꺼운 얼룩보다 더 구체적인 기술이지만 두꺼운 얼룩은 세포 외 혈액 기생충에 대한 철저한 검색에 사용되는 농축 기술이기 때문에 더 민감합니다.

미세 드롭 스미어에는 슬라이드에서 수행되는 것과 커버 슬립에서 수행되는 두 가지 유형이 있습니다. 두꺼운 얼룩은 슬라이드에서 수행됩니다.

혈액 샘플 채취 기술

혈액 도말은 모세 혈관 천자 또는 항응고제로 채취 한 정맥 샘플로 만들 수 있습니다. 항응고제를 사용하여 혈액에서 수행하는 경우 검체 채취 후 최대 2 시간까지 도말을 준비 할 수 있습니다.

혈액 세포를 변형하지 않는 항응고제 사용에주의해야합니다. 가장 좋은 옵션은 EDTA입니다. 반대로 구연 산삼 나트륨과 같은 항응고제의 사용은 피해야합니다.

모세 혈관 천자에 의해 샘플을 채취 한 경우 혈전이 생기기 직전에 도말을 확장해야합니다.

첫 번째 방울은 폐기해야하며, 다음 방울이 자발적으로 빠져 나가 조직액으로 샘플이 희석되는 것을 방지해야합니다. 혈액에는 첨가물이 없기 때문에 세포 형태 관찰에 가장 권장되는 기술입니다.

혈액 기생충의 관찰을 위해 Solari 등은 연구 작업에서 두 ​​기술 (정맥 천자 및 모세관)이 똑같이 효율적이라는 결론을 내 렸습니다.

채혈 유형 : A. 모세관 천자. B. 정맥 천자. 출처 : A. Flickr.com B. Pxhere.com

혈액 도말 준비 기술

혈액 도말 검사는 현미경 슬라이드 또는 커버 슬립 또는 슬라이드에서 수동으로 수행 할 수 있습니다. 자동화 장비를 통해서도 가능합니다.

-슬라이드 얼룩

취급이 쉽기 때문에 대부분의 실험실에서 선호하는 기술입니다.

파스퇴르 피펫을 사용하여 아주 두껍지 않거나 아주 미세하지 않은 혈액 방울을 깨끗한 슬라이드의 한쪽 끝 중앙에 놓습니다.

얼룩은 접지 끝이있는 다른 슬라이드의 도움으로 이루어집니다. 지상 유리 슬라이드는 방울이있는 반대쪽 끝에 수직으로 배치됩니다.

30-45 ° 사이의 각도로 기울어지고 드롭쪽으로 미끄러집니다. 터치하면지면 슬라이드의 가장자리 위로 선형으로 확장되고 일정하고 정의 된 움직임으로 시트가 반환됩니다. 끝에 도달하기 전에 슬라이드를 들어 올립니다.

이러한 방식으로 균질 한 층이 수신 슬라이드의 표면에 퍼집니다.

번짐은 건조됩니다. 그런 다음 고정되고 선호하는 얼룩으로 염색됩니다. 현미경으로보기 전에 잘 말리십시오. 얼룩이 보이는 얼굴에 기름 방울을 바르고 광학 현미경으로 관찰합니다.

슬라이드에 피가 묻어 있습니다. 상단 이미지 : 얼룩이 묻지 않은 얼룩. 하단 이미지 : 얼룩진 얼룩. 출처 : Coinmac

슬라이드에 만들어진 얼룩 부분

이 유형의 얼룩에서는 머리, 몸통 및 꼬리의 세 가지 정의 된 영역을 구분할 수 있습니다. 머리는 번짐이 시작되는 영역에 해당하고 가장 두꺼운 영역이며 관찰하는 것이 좋지 않습니다.

몸은 도말의 중앙 또는 중간 부분이며, 세포가 균일하게 분포되어 있고 그 형태가 보존되기 때문에 현미경으로 관찰하기에 가장 좋은 영역입니다.

꼬리는 얼룩의 마지막 부분에 해당합니다. 여기서 분포는 더 이상 균일하지 않으며 적혈구 형태가 손실되는 경향이 있습니다.

슬라이드 기법의 품질 관리

이 기술에서는 다음과 같은 기본적인 역할을합니다.

-슬라이드의 세척 및 탈지 : 샘플의 양호한 슬라이딩을 보장합니다.

-방울의 크기 : 매우 큰 방울을 사용하면 더 두껍고 긴 번짐이 얻어지며, 아주 작은 방울을 사용하면 스프레드가 더 짧고 매우 미세합니다.

-익스텐션에 적용되는 속도 : 스미어 속도가 낮을수록 속도가 빨라집니다.

-실행 각도 : 각도가 작을수록 얼룩이 미세할수록 각도가 두꺼워집니다.

-coverslip에 단계

깨지기 쉬운 커버 슬립의 취급이 번거롭기 때문에 널리 사용되지는 않지만, 도말 전체에 걸쳐 더 나은 세포 분포가 얻어지기 때문에 큰 이점을 제공합니다.

매우 두껍지 않고 미세하지 않은 방울이 커버 슬립 중앙에 놓입니다. 즉시 두 개의 커버 슬립의 끝이 튀어 나와 별을 형성하는 방식으로 다른 커버 슬립이이 위에 배치됩니다.

드롭은 두 커버 슬립의 표면에 자연스럽게 퍼집니다. 확장이 끝나면 각 슬라이드가 서로 반대쪽 (하나는 오른쪽으로, 다른 하나는 왼쪽으로)으로 빠르게 미끄러집니다.

이 기술은 한 번이 아닌 두 번의 번짐을 제공합니다.

펼쳐진면을 위로하여 건조시킵니다. 건조되면 선택한 기술로 고정되고 염색됩니다. 말리십시오. 한 방울의 침지 오일을 슬라이드에 놓고, 도말면이 아래로 향하도록 도말을 놓고 현미경으로 봅니다.

coverslip 기술의 품질 관리

이 기술에 대한 좋은 얼룩을 얻으려면 다음이 중요합니다.

-커버 슬립 청소 (샘플 슬라이드를 부드럽게 돕습니다).

-방울의 크기 (번짐의 두께에 영향을 미침).

-커버 슬립이 분리되는 속도 (스프레드의 균질성에 영향을 미침).

-자동 장비

Spinner 및 Autoslide 팀 중 하나를 통해 수행 할 수 있습니다.

스피너는 특수 원심 분리기 플레이트에 피 한 방울이 담긴 슬라이드를 놓는 것으로 구성됩니다. 샘플은 고속으로 원심 분리됩니다. 이러한 방식으로 샘플의 균일하고 미세한 얼룩이 형성됩니다. 시료의 용혈 가능성이 있다는 단점이 있습니다.

Autoslide는 슬라이드에서 스미어를 실행하기위한 움직임을 기계적으로 수행하는 도구입니다. 얼룩을 수정하고 얼룩을 낼 수도 있습니다. 일부 자동 혈액 카운터에도 적용 할 수 있습니다.

두꺼운 스미어 기법

혈액 기생충을 검색하려면 두 번의 번짐이 권장됩니다. 하나는 미세 방울이 있고 다른 하나는 두꺼운 방울이 있습니다.

모세관 천자를 수행하고 첫 번째 방울을 청소하십시오. 슬라이드에 미세한 방울을 놓고 이전에 설명한대로 번집니다. 두꺼운 비드의 경우 큰 비드를 다른 슬라이드에 놓고 1.55mm 정사각형으로 펼칩니다. 두 번의 얼룩을 말리십시오.

얼룩 얼룩

특히 Giemsa 또는 Wright 얼룩은 미세한 방울에 사용할 수 있습니다. Giemsa 또는 May-Grunwald Giemsa 얼룩은 두꺼운 얼룩에 권장됩니다.

김사 스테인

도말은 메탄올로 3 분 동안 고정되고 배수되고 다시 건조됩니다. 그런 다음 10-15 분 동안 Giemsa 얼룩으로 얼룩을 덮습니다. 증류수로 세척하고 건조시킵니다. 현미경으로 관찰하기 위해 액침 오일 한 방울을 놓습니다.

라이트의 얼룩

얼룩은 5 분 동안 Wright의 얼룩으로 덮여 있습니다. 버퍼 용액을 버리고 pH 6.8에서 6 분 동안 놓습니다. 균질화하기 위해 준비물을 불어 넣습니다. 증류수로 씻고 말리십시오. 현미경으로 관찰하십시오.

결함이있는 얼룩의 유형

슬라이드가있는 파인 드롭 기법의 연습생에게서 발생합니다.

두께가 다른 영역의 번짐 (얇고 두꺼운 부분이 산재 해 있음)

스프레드 중에 실행 된 움직임이 일정하지 않아 정지하고 다시 시작하기 때문입니다.

매우 짧은 번짐

두 가지 원인이 있습니다. 하나는 슬라이드의 다른 쪽 끝에 도달하기 전에 그라운드 슬라이드를 들어 올렸기 때문입니다. 이 경우 매우 두껍고 짧습니다.

반면에 번짐이 짧지 만 얇다면 방울의 크기가 매우 작기 때문입니다.

도말 끝 부분에 긁힌 부분이있는 도색

원인은 여러 가지가 있습니다. 하나는지면 가장자리에 결함이 있거나 펼칠 때 수신 슬라이드에 가해지는 압력이 증가하거나 슬라이드의지면 가장자리가 마모 된 것입니다.

액포 형성 또는 명확한 둥글거나 타원형 영역으로 번짐

그들은 기름기 많은 얼룩 (잘 씻지 않고 탈지)을 사용하기 때문입니다.

매우 두껍거나 매우 얇은 얼룩

너무 큰 방울은 처음부터 끝까지 매우 두꺼운 얼룩을 생성하고 아주 작은 방울은 매우 미세한 얼룩을 생성합니다.

조직학

혈액 도말에서 혈액 세포를 볼 수 있습니다. 그중에는 다음이 포함됩니다.

-적혈구 또는 적혈구

인간의 혈액, 적혈구 또는 적혈구 및 두 개의 백혈구. 출처 : Viascos 귀하의 관찰은 가장 중요합니다. 이 수준에서 빈혈, 지중해 빈혈, 골수 질환 등을 감지 할 수 있습니다.

적혈구 또는 적혈구의 수는 남성의 경우 약 5 x 10 ⁶ mm3, 여성의 경우 4.5 x 10 ⁶ 입니다. 적혈구는 중앙 생리 학적 창백한 양면 오목 디스크 모양입니다. 이들은 별도로 (정상) 보이거나 룰로 스택 (비정상)을 형성 할 수 있습니다.

얼룩은 또한 poikilocytosis (다양한 모양의 적혈구), anisocytosis (다양한 크기의 적혈구), anisopoikilocytosis (다양한 모양과 크기), anisochromia (다른 색상), erythroblasts (미성숙 적혈구), microcytosis (작은 적혈구)를 보여줍니다 ) 및 거대 세포 (더 큰 적혈구).

헤모글로빈의 양이 부족하고 중앙 창백이 증가하면 저 색소 증이 있다고합니다. 정상적인 적색 계열이 관찰되면 정상 세포 및 정상 변색으로보고됩니다.

-백혈구 또는 백혈구

백혈구

정상적인 양은 5,000에서 10,000 mm ³ 입니다. 그들은 전염성 과정, 알레르기 및 백혈병에서 변경됩니다. 혈액 도말에서 여러 유형을 구별 할 수 있으며, 아래에 설명되어 있습니다.

분절 된 호중구

그들은 전체 백혈구의 55-65 %를 차지합니다. 그들은 10-15 μm 사이에서 측정됩니다. 그들은 다른 형태를 채택하는 분절 또는 엽핵을 가지고 있으므로 다형 핵이라고합니다.

그들은 세포질과 일부 azurophil에 풍부한 호중구 과립을 가지고 있습니다. 박테리아 감염 (호중구 감소증)이 증가하고 바이러스 감염이 감소합니다 (호중구 감소증).

흉막 세포증 (초 분절 핵), 아치 (미성숙 세포) 또는 거대 경찰 (타원형 및 대형)과 같은 형태 학적 이상이 관찰 될 수 있습니다.

기타 변경 :

-독성 과립

-Pseudo Pelger 호중구 (핵이 lobulation을 나타내지 않거나 bilobed).

-Döhle 몸 : 진한 파란색 세포질 내포물.

-증가 된 세포질 basophilia.

-Intracytoplasmic 액포.

-세포 피크 노 시스 (핵간 다리의 손실).

분절 된 호산구

그들은 전체 백혈구의 1-3 %를 차지합니다. 그들은 9-10 μm를 측정합니다. 그들은 풍부한 호 산성 세포질 과립과 소수의 호 산성 과립의 존재가 특징입니다. 그 핵에는 두 개의 소엽이 있습니다. 기생충의 알레르기와 질병이 증가합니다.

분할 된 호염기구

백혈구의 0-1 %를 차지하는 극히 드물다. 그들은 10-12μm를 측정합니다. 핵은 일반적으로 가장자리가 불규칙하고 이중 엽일 수 있지만 세포질에 많은 호 염기성 거친 과립이 존재하므로 보이지 않습니다. 아주 드물게 basophilia를 볼 수 있습니다.

림프구

그들은 호 염기성 세포질을 가진 작은 세포이며, 핵이 잘 정의되고 둥글며 응축 된 염색질이 있습니다. 핵은 거의 전체 세포를 포함합니다. 그들은 혈액 백혈구의 26-40 %를 차지합니다. 바이러스 감염 (림프구 증)이 증가합니다. 반응성 림프구를 볼 수 있습니다.

단핵구

림프구보다 크고 세포질이 더 크고 타원형의 염색질 핵이 느슨합니다. 그들은 9-12μm를 측정합니다. 세포질은 풍부하며 일반적으로 표준 염색 기술로 옅은 회백색으로 보입니다. Vacuolated monocytes 및 monocytosis는 변경 사이에서 관찰 될 수 있습니다.

-혈소판

그들은 1.5-3 μm 사이에서 측정됩니다. 그 모양은 둥글거나 타원형입니다. 정상 값은 150,000 ~ 350,000 혈소판 / mm3입니다. 일부 바이러스 감염이 감소 할 수 있습니다. 그들은 핵이 없으며 보라색입니다. 이 시리즈에서는 거대 또는 미세 혈소판, 혈소판 증 또는 혈소판 감소증, 혈소판 조각과 같은 이상이 나타날 수 있습니다.

병리학 적 요소

혈액 기생충

말라리아 또는 말라리아 (Plasmodium 속의 기생충)의 원인균과 같은 혈액 기생충은 혈액 도말에서 볼 수 있습니다. 이러한 이유로 자동화 장비가이 결과를 놓치기 때문에 스미어를 수동으로 분석하는 것이 중요합니다.

박테리아

재 발열이나 라임 병과 같은 병리학에서는 그 원인이되는 인자를 관찰 할 수 있습니다. 이 경우 혈액 도말에서 Borrelia recurrenti spirochetes 및 Borrelia burgdorferi에 해당합니다.

미성숙 세포

백혈병, 백혈병 반응 및 백혈구 적혈구 모세포 반응에서 심각한 사례가 관찰됩니다. 박테리아 감염에서는 왼쪽에 약간의 편차가있을 수 있습니다 (악당의 존재). 적혈구는 일부 빈혈에서도 볼 수 있습니다.

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