- 그것은 무엇입니까?
- 기초
- 환자의 나이에 따라
- 미생물의 종류에 따라
- 방법
- 샘플링 권장 사항
- 샘플 수량
- 견본 추출
- 샘플링 전 무균
- 샘플 추출
- 문화
- 결과
- 혈액 배양이 양성인지 오염인지 확인하는 방법
- 참고 문헌
혈액 배양은 혈액에 미생물의 존재를 감지하기 위해 추구 세균 테스트입니다. 혈액은 본질적으로 살균 된 액체이므로 생리 학적 조건하에 보관해야하므로 혈액에 박테리아 나 곰팡이가 존재하는 것은 항상 병적입니다.
혈액에서 박테리아 나 진균이 발견되었지만 증식이 면역 체계에 의한 미생물 제거를 초과하지 않는 경우이를 균혈증 (박테리아의 경우) 또는 진 균혈증 (진균의 경우)이라고합니다. 그러나 미생물이 통제 할 수 없을 정도로 증가하면이를 패혈증이라고합니다.
혈액 배양 병 (노란색 : 소아 성 에어로 바이오 증, 녹색 : 성인 에어로 바이오 증, 빨간색 : 성인 혐기 생물). 출처 : MSc Marielsa Gil이 찍은 사진.
균혈증, 진 균혈증 및 패혈증은 환자의 생명을 위협하므로 즉시 치료해야합니다. 그렇기 때문에 혈액에 감염이 의심되면 의사는 혈액 배양 검사를 요청합니다.
이 세균 학적 분석을 통해 혈액에 감염이 있는지 여부와 관련된 미생물이 무엇인지 알 수 있습니다. 또한 양성이면 어떤 항생제 나 항진균제를 치료에 사용할 수 있는지 알아보기 위해 민감도 검사를 실시합니다.
반면에 24 시간 배양에서 혈액 배양이 음성이면 240 시간 동안 음성이 될 때까지 폐기해서는 안됩니다. 이것은 천천히 성장하는 미생물이 없음을 보장합니다.
혈액 배양을 신뢰할 수 있으려면 샘플 채취시 극도의 무균 조치를 취해야하며, 검사의 신뢰성과 민감도를 높이기 위해 열이 최고조에 달하는 동안 또는 그 부근에서 최소 2 개의 샘플을 채취해야합니다.
그것은 무엇입니까?
혈액은 살균 된 액체이며 미생물이 발견되면 100 % 병적입니다. 이 상황은 환자의 삶을 타협하는 매우 섬세한 임상상을 나타냅니다.
혈액 배양은 혈류에서 미생물의 존재를 감지하는 중요한 세균 검사입니다.
미생물은 다양한 경로를 통해 혈액에 도달 할 수 있으며, 이는 특히 폐렴, 복강 내 감염, 신우 신염, 심각한 피부 감염, 연조직 또는 관절염과 같은 혈관 외 감염 일 수 있습니다.
또는 정맥 내 또는 동맥 카테터 오염, 심내막염, 정맥 내 약물 중독, 오염 된 약물 또는 용액 투여 등과 같은 정맥 내로도 발생할 수 있습니다.
패혈증의 원인 인자를 적시에 탐지하고 치료하는 것은 환자의 생존을 보장하는 데 필수적입니다.
이러한 의미에서 의사는 명백한 감염 초점이없는 발열 (38 ° C 이상) 또는 반대로 저체온증 (<de)과 같이 패혈증을 시사하는 징후와 증상을 관찰 할 때 혈액 배양의 실현을 나타내야합니다. 36 ° C).
다른 징후는 오한, 백혈구 수 증가 (> 10,000 세포 / mm 3 ) 또는 다형 핵 세포의 현저한 감소 (<1,000 PMN / mm 3 ) 일 수 있습니다. 다른 경고 신호 중에서도 갑작스러운 다기관의 악화 또는 활력 상실.
균혈증은 일정하거나 일시적이거나 간헐적 일 수 있습니다. 미생물이 순환하는 것을 발견 할 확률이 더 높을 때 채취해야하므로 샘플 채취시 중요합니다.
따라서 다른 장소에서 최소 2 개의 샘플을 채취하는 것이 좋습니다. 또한 이상적으로는 열이 최고조에 달하거나 환자가 떨림, 극심한 저체온증, 발한 또는 빈맥이 나타날 때 샘플을 채취하는 것입니다.
그러나 혈액 배양이 진정으로 유용한 도구가되기 위해서는 샘플을 극도로주의해서 채취해야합니다. 검체를 채취하는 순간 조작이 잘못되거나 무균 상태가 좋지 않으면 검사가 무효화되어 오탐을 얻을 수 있습니다.
기초
이 연구는 2 ~ 3 개의 혈액 샘플을 무균 적으로 채취하여 특수 병에 넣는 것으로 구성됩니다.
혈액 샘플을 배양하기위한 특수 장치를 혈액 배양 병이라고합니다. 이들은 다음과 같이 분류됩니다.
환자의 나이에 따라
-소아용
-성인을위한.
미생물의 종류에 따라
-호기성 미생물 (호기성 세균, 통성 세균 및 균류) 용 플라스크.
-혐기성 미생물 (엄격한 혐기성 세균)을위한 혈액 배양 병.
일부는 액체 배양 배지를 포함하고 일부는 고체 및 액체 배양 배지를 동시에 포함합니다. 그들은 또한 활성탄 입자와 함께 존재합니다.
방법
샘플링 권장 사항
-미생물학 분야에서 고도로 훈련되고 훈련 된 직원이 채취 할 샘플.
-시료 채취 장소의 무균 또는 철저한 청소는 의심 할 여지없이 가장 중요한 단계입니다.
-모든 시료 채취와 마찬가지로 보건 요원은 과정 (장갑, 가운, 안경 등 사용) 동안 생물 보안 조치를 완전히 준수해야합니다.
-샘플 채취에 필요한 모든 도구가 준비되어 있는지 확인하십시오.
-환자의 이름, 날짜, 의료 기록 번호, 샘플 수집 시간 및 실험실 시퀀스 번호로 바이알에 라벨을 붙입니다.
-환자가 항균 요법을 시작하기 전에 샘플을 채취하는 것이 이상적입니다. 진행중인 치료의 비 작동이 의심되는 경우에만 표시됩니다. 이 경우 항생제 억제제 (활성탄 입자)가 포함 된 혈액 배양 병을 사용하여 약물 변경 전에 샘플을 채취해야합니다.
-오른팔과 왼팔과 같은 다른 해부학 적 부위에서 최소 2 개의 샘플을 채취해야합니다. 심내막염이 의심되는 경우 3 개의 검체가 권장됩니다. 각 샘플에는 두 개의 병이 포함됩니다 (하나는 호기 생물 용, 다른 하나는 혐기 생물 용).
샘플 수량
샘플의 양은 환자의 나이에 따라 다르지만 혈액 / 배양액 희석에 대해 항상 1 : 5 ~ 1 : 10의 비율을 유지해야합니다.
신생아의 경우 권장되는 샘플 양은 바이알 당 혈액 1ml입니다. 소아용 병이 사용됩니다.
1 개월에서 1 년 사이의 영아의 경우 1 병당 혈액 1.5ml까지 증량 할 수 있습니다. 소아용 병이 사용됩니다.
2 세 이상의 소아에서 적절한 검체량은 바이알 당 혈액 2.5ml입니다. 소아용 병이 사용됩니다.
청소년기부터 병당 5 ~ 10ml 사이의 혈액량으로 늘릴 수 있습니다. 성인용 병이 사용됩니다.
마지막으로 성인 단계에서 필요한 양은 병당 8-10ml입니다. 성인용 병이 사용됩니다.
견본 추출
-혈액 샘플은 정맥 또는 동맥 일 수 있습니다. 그러나 동맥혈은 정맥 채취가 불가능한 경우에만 채취됩니다.
-다음과 같은 경우가 아니면 중앙 정맥 카테터에서 검체를 채취하지 않는 것이 좋습니다.
- 샘플을 말초 (정맥 또는 동맥)로 채취하는 것은 불가능합니다.
- 출혈 위험이있는 환자.
- 의사가 중앙 정맥 카테터의 오염으로 인해 균혈증을 의심 할 때.
- 환자가 항균 치료를 받고 있는지 여부에 관계없이 4 ~ 5 일의 열이 멈춘 후 열이 다시 나타날 때.
샘플링 전 무균
-샘플링을위한 해부학 적 부위를 선택합니다. 일반적으로 최고의 구경의 정맥이 선택됩니다 (바실리 또는 두부 정맥).
-미국 애틀랜타 질병 통제 센터 (CDC)에 따르면 작업자는 장갑을 끼고 채취 전에 2 % 클로르헥시딘 또는 10 % 포비돈 요오드로 손을 씻어야합니다.
-사용할 정맥을 촉지하고 찾습니다.
-비눗물 클로르헥시딘 또는 방부제 비누를 사용하여 중앙에서 바깥쪽으로 움직이면서 회전하는 방식으로 펑크 부위를 청소합니다. 멸균 식염수로 헹굽니다.
그 후, 방부제를 바르고 그대로 두십시오. 1 분 동안 클로르헥시딘 글루코 네이트 0.5 % 또는 2 분 동안 포비돈 요오드 10 %의 예. 후자의 경우 먼저 환자가 요오드에 알레르기가 있는지 물어보십시오. 알레르기가있는 경우 70 % 알코올로 대체 할 수 있습니다.
샘플 추출
-지혈대를 놓아 혈류를 악화시키고 정맥을 싹이 트십시오.
-다시 손가락으로 천자 부위를 만지지 마십시오. 이것이 꼭 필요한 경우 손가락은 펑크 부위와 같은 방법으로 씻어야합니다.
-주입기 바늘이나 두피를 정맥에 삽입하고 필요한 양의 혈액을 추출합니다.
-무균 상태가 아닌 경우 바늘을 제거 할 때면이나 거즈를 바늘에 대지 마십시오.
-뚜껑을 만지지 않고 병에서 보안 씰을 매우 조심스럽게 제거하십시오. 일부 저자는 샘플을 접종하기 전에 캡을 소독 할 것을 권장합니다.
-바이알에 적절한 양의 혈액을 분배합니다. 인젝터로 시료를 채취 한 경우 먼저 혐기성 플라스크에 필요한 양을 붓고 호기성 플라스크에 넣습니다. 두피 (나비)로 복용하면 반대 방향으로 붓습니다.
-혈액 배양 병을 뒤집어서 부드럽게 섞는다.
-장갑을 교체하고 두 번째 샘플 수집을 위해 이전 단계를 반복합니다.
-두 번째 샘플을 다른 사이트에서 채취 한 경우 즉시 수행 할 수 있지만 동일한 사이트에서 가져온 경우 한 샘플간에 30 ~ 90 분 정도 기다려야합니다.
-샘플은 가능한 한 빨리 실험실로 가져 가야하며, 가능하지 않은 경우 최대 18 시간 동안 실온에 두어야합니다.
문화
일단 실험실에 들어가면 플라스크는 각 플라스크의 조건, 즉 각각 호기 생물 및 혐기 생물에서 37 ° C에서 배양됩니다.
수동 방법에서는 24 시간 배양 후 벨소리를 시작한 다음 매일 울리도록합니다. 링은 다음과 같이 수행됩니다. 먼저 병 뚜껑을 소독하고 멸균 주입기의 바늘을 삽입합니다. 플라스크에서 액체를 추출하여 혈액 한천과 초콜릿 한천에 뿌립니다.
성장이 있으면 그람이 수행되고 특정 배지에서 계대 배양, 생화학 검사 및 항생제가 수행됩니다.
자동화 된 방법에서 Bact / Alert 장비는 바이알이 양성임을 감지하면 경보를 내 보냅니다. 같은 방법으로 blood agar와 chocolate agar에 두 드려야합니다.
또 다른 방법은 질량 분석법을 통해 6 시간 배양 한 후 플라스크를 분석하는 것입니다. 이 방법은 진단의 민감도와 속도를 높이는 데 도움이되었습니다.
결과
혈액 배양 병이 음성 인 한, 예비 중간 보고서를 치료 의사에게 제공 할 수 있습니다. 보고서는 그것이 부화 한 시간에 음성임을 나타냅니다. 예를 들어, 4 일째까지 음수가되면 다음과 같이보고됩니다.
예비 결과 : 96 시간 배양에서 음성 배양.
참고 : 연구는 240 시간 동안 계속됩니다.
혈액 배양이 양성이면 치료 의사에게 즉시 알리고 최소한 콜로니의 그램이 포함 된 보고서를 보냅니다. 예:
예비 결과 : 48 시간 배양에서 양성 배양에서 그람 음성 간균 및 음성 산화 효소가 관찰되었습니다. 식별 및 감도 테스트가 진행 중입니다.
이 정보는 치료 의사가 실험실의 최종 결과를 기다리는 동안 가능한 미생물에 대한 경험적 치료를 시작하도록 안내합니다.
세균학 연구가 완료되면, 즉 미생물이 확인되고 항생제가 제공되면 가능한 한 빨리 최종 보고서를 보내야합니다.
표적 유기체가 Neisseria gonorrhoeae 또는 Neisseria meningitidis 인 경우 이러한 박테리아는 고농도의 소듐 폴리 아네 토설 포 네이트 (SPS) 존재 하에서 억제되므로 특별한주의가 필요합니다.
이것이이 화합물이 혈액 배양 병에서 0.025 %를 초과해서는 안되는 이유입니다.
반면에 Vacutainer 튜브에서 혈액 배양 샘플을 처음 채취 한 경우이 튜브에는 수막 구균 및 임균에 독성이있는 SPS 농도가 있으므로 혈액은 1 시간 이내에 국물 배양 시스템으로 옮겨야합니다.
혈액 배양이 양성인지 오염인지 확인하는 방법
채취 한 전체에서 단 하나의 혈액 배양 바이알에만 성장이있을 때 혈액 배양은 오염 된 것으로 간주됩니다. 그리고 분리 된 미생물이 습관성 피부 미생물 인 경우 오염 의혹이 증가합니다. 예 : Staphylococcus coagulase negative, Propionibacterium spp 등.
그러나 면역이 약한 환자의 경우 미생물을 무시해서는 안되지만이 경우 미생물은 여러 샘플에 나타나야합니다.
반면에, 두 개의 다른 샘플에서 분리 된 동일한 미생물의 항생제에 대한 민감도가 같으면 감염은 실제입니다.
또 다른 특징은 오염 된 혈액 배양이 늦게 자라는 반면, 치료되지 않은 환자의 실제 감염은 일반적으로 미생물이 비 호환성 일 때 배양 14 시간에서 양성이기 때문에 박테리아 부하입니다.
반면에 항균제로 치료받은 환자의 경우 부하가 매우 적기 때문에 관련된 미생물이 성장하는 데 시간이 걸릴 수 있습니다.
하나 이상의 미생물의 출현은 오염을 암시 할 수 있지만 동일한 결과가 다른 사이트의 여러 샷에서 반복되면 실제입니다.
참고 문헌
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