조직 화학이 때문에 탄수화물, 지질과 단백질, 다른 사람의 사이에서, 화학 염료 등의 조직 구성 요소의 반응 원리에 다양한 생물학적 조직 (식물과 동물)의 형태의 연구에 유용한 도구입니다.
이 귀중한 도구를 사용하면 조직과 세포의 구성과 구조를 식별 할 수있을뿐만 아니라 그 안에서 발생하는 다양한 반응도 확인할 수 있습니다. 마찬가지로, 미생물이나 다른 병리의 존재로 인한 가능한 조직 손상이 입증 될 수 있습니다.
조직 화학 얼룩. 나일 바이러스, 그람 양성 및 그람 음성 박테리아 (Gram), Histoplasma capsulatum (Grocott), Mycobacterium tuberculosis (Ziehl Neelsen). 출처 : Pixinio.com/Wikipedia.org/Nephron / CDC / Dr. 조지 P. 쿠비 카
지난 수세기 동안 조직 화학은 폴 에를리히 (Paul Ehrlich)에 의한 혈액 뇌 장벽의 존재를 증명하는 것과 같은 중요한 공헌을 해왔습니다. Ehrlich가 사용한 실험 동물의 뇌가 염기성 염료 인 아닐린으로 염색되지 않았기 때문에 가능했습니다.
이로 인해 다양한 유형의 세포를 염색하기 위해 메틸렌 블루 및 인도 페놀과 같은 다양한 염료를 사용하게되었습니다. 이 발견은 특정 염색에 따라 세포를 호 염성, 호 염성 및 호 중성으로 분류했습니다.
최근 연구는이 기술을 적용하여 월계수로 더 잘 알려진 Litsea glaucescens 종의 조직에 페놀, 탄수화물 및 비 구조 지질을 포함한 다양한 화합물의 존재를 보여줍니다. 잎과 나무 모두에서 이것들을 찾습니다.
마찬가지로 Colares et al, 2016은 조직 화학적 기법을 사용하여 약용 식물 인 Tarenaya hassleriana를 식별했습니다. 이 종에서 전분, 미로 신, 페놀 및 친 유성 화합물의 존재가 입증되었습니다.
기초
조직 화학은 특정 염료와의 친 화성 덕분에 조직에 존재하는 세포 구조 또는 분자의 염색을 기반으로합니다. 이러한 구조 또는 분자의 원래 형식의 착색 반응은 나중에 광학 현미경 또는 전자 현미경으로 시각화됩니다.
염색의 특이성은 세포 또는 조직 분자에 존재하는 이온 수용 그룹의 존재 때문입니다.
마지막으로, 조직 화학적 반응의 목적은 염색을 통해이를 보여줄 수있는 것입니다. 가장 큰 생물학적 구조에서 가장 작은 조직과 세포까지. 이것은 염료가 조직, 세포 또는 소기관의 분자와 화학적으로 반응한다는 사실 덕분에 달성 될 수 있습니다.
기소
조직 화학 반응은 조직의 고정, 삽입 및 절단과 같은 기술을 수행하기 전에 단계를 포함 할 수 있습니다. 따라서 이러한 단계에서 식별 할 구조가 손상되어 존재하더라도 위음성 결과를 초래할 수 있다는 점을 고려해야합니다.
그럼에도 불구하고,자가 분해 또는 세포 파괴를 방지하기 때문에 적절하게 수행 된 조직의 사전 고정이 중요합니다. 이를 위해 화학 반응은 포름 알데히드 또는 글루 타르 알데히드와 같은 유기 용매와 함께 사용됩니다.
직물을 포함하여 절단시 견고 함을 유지하여 변형을 방지합니다. 마지막으로 광학 현미경으로 샘플을 연구하기 위해 마이크로톰으로 절단합니다.
또한 조직 화학적 염색을 진행하기 전에 각 테스트 배치에 외부 또는 내부 양성 대조군을 통합하는 것이 좋습니다. 연구 할 구조를위한 특정 염료의 사용.
조직 화학적 얼룩
조직 화학적 기술의 출현부터 현재까지,주기 산 쉬프 (PAS), 그로 콧, 질-닐슨 및 그람과 같이 가장 자주 사용되는 얼룩을 포함하여 광범위한 얼룩이 사용되었습니다.
마찬가지로 인도 잉크, orcein 또는 Masson의 삼색 염색과 같은 다른 염료는 덜 자주 사용되었습니다.
PAS (Periodic Acid Schiff)
이 착색으로 글리코겐 및 뮤신과 같이 탄수화물 함량이 높은 분자를 관찰 할 수 있습니다. 그러나 곰팡이 및 기생충과 같은 미생물 식별에도 유용합니다. 피부 및 기타 조직의 특정 구조 (기저막) 외에.
이 염색의 기초는 염료가 인접한 두 수산기 사이의 탄소 결합을 산화한다는 것입니다. 이것은 알데히드 그룹의 방출을 생성하고 이것은 Schiff의 시약에 의해 감지되어 자주색을 나타냅니다.
Schiff의 시약은 염기성 푹신, 메타 중아 황산나트륨 및 염산으로 구성되며, 이러한 성분은 알데히드기가 존재할 때 자주색 착색을 담당합니다. 그렇지 않으면 무색의 산이 생성됩니다.
착색의 강도는 단당류에 존재하는 수산기의 양에 따라 달라집니다. 예를 들어, 곰팡이, 기저막, 뮤신 및 글리코겐에서는 색이 빨간색에서 보라색으로 변할 수있는 반면 핵은 파란색으로 변합니다.
Grocott
파라핀이 묻힌 조직에서 곰팡이를 식별하는 데 가장 민감하게 반응하는 얼룩 중 하나입니다. 이를 통해 균사, 포자, 내생 포자 등 다양한 곰팡이 구조를 식별 할 수 있습니다. 따라서 진균증 진단을위한 일상적인 얼룩으로 간주됩니다.
특히 Pneumocystis 속과 Aspergillus 속의 일부 진균에 의해 발생하는 pneumocystosis 및 aspergillosis와 같은 폐 진균증의 진단에 특히 사용됩니다.
이 용액에는 질산은과 크롬산이 포함되어 있으며 후자는 고정 제 및 착색제입니다. 이론적 근거는이 산이 진균 구조, 예를 들어 진균의 세포벽에 존재하는 뮤코 폴리 아카 리드에 의해 히드 록 실기의 알데히드로의 산화를 생성한다는 것입니다.
마지막으로 용액에 존재하는 은은 알데히드에 의해 산화되어 검은 색 착색을 일으켜 아르 젠타 핀 반응이라고합니다. 밝은 녹색과 같은 대조 염료도 사용할 수 있으므로 곰팡이 구조는 밝은 녹색 배경에 검정색으로 관찰됩니다.
Ziehl-Neelsen
이 염색은 Nocardia, Legionella 및 Mycobacterium 속과 같은 일부 미생물에서 부분적으로 또는 전체적으로 산-알코올 내성의 존재를 기반으로합니다.
이전에 언급 한 미생물의 세포벽에는 염료 침투를 방해하는 복잡한 지질이 포함되어 있기 때문에이 얼룩을 사용하는 것이 좋습니다. 특히 호흡기 샘플에서.
여기에는 carbol fuchsin (염기성 착색제)과 같은 강한 착색제를 사용하고 열을 가하여 미생물이 착색제를 유지할 수 있고 산과 알코올로 변색되지 않도록합니다. 마지막으로 메틸렌 블루 용액을 적용하여 변색 된 구조를 채색합니다.
산-알코올 저항성의 존재는 적색으로 염색 된 구조에서 관찰되는 반면, 색 바램에 저항하지 않는 구조는 청색으로 염색됩니다.
그램과 중국 잉크
그람은 박테리아 및 곰팡이 감염의 진단에 매우 유용한 얼룩입니다. 이 염색은 그람 양성 미생물과 그람 음성 미생물을 구별 할 수있게하여 세포벽 구성에 존재하는 차이를 명확하게 보여줍니다.
인도 잉크는 다당류 (캡슐)를 포함하는 구조를 대조하는 데 사용되는 얼룩입니다. 이것은 Cryptococcus neoformans에서 가능한 고리가 환경에서 형성되기 때문입니다.
오르세 인
이 염색을 통해 다양한 세포의 탄성 섬유와 염색체가 착색되어 후자의 성숙 과정을 평가할 수 있습니다. 이러한 이유로 세포 유전학 연구에서 매우 유용했습니다.
이것은 다양한 세포의 핵에 존재하는 DNA와 같은 분자의 음전하에 의한 염료의 흡수를 기반으로합니다. 그래서 이것들은 파란색에서 진한 보라색으로 염색됩니다.
Masson의 삼색
이 얼룩은 멜라닌 색소를 포함하는 일부 미생물이나 물질을 식별하는 데 사용됩니다. 이것은 dematiaceous fungi, pheohifomycosis 및 black-grained eumycetoma에서 발생하는 진균증의 경우입니다.
마지막 생각들
최근 몇 년 동안 조직 화학이 관련되어 있지만 다른 기본 또는 원리와 연결된 새로운 진단 기술의 개발에 많은 발전이있었습니다. 이러한 기술은 면역 조직 화학 또는 효소 조직 화학의 경우와 같이 다른 목적을 가지고 있습니다.
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