침지 오일 굴절률을 가지는 높은 점성의 투명한 액체이다. 이러한 이유로 현미경의 100X 대물 렌즈를 통과 할 때 빛을 집광하는 특성을 제공하여 분해능을 높이기 때문에 현미경 관찰에 널리 사용됩니다.
이는 대물 렌즈와 스미어 사이에 점성 필름이 형성되어 공기에 도달 할 때 광선이 산란되는 것을 방지하여 광선이 시료쪽으로 집중되기 때문에 발생합니다.
오일 침지 기능이있는 드롭퍼와 오일 침지 방식을 사용하여 100X 대물 렌즈로 초점을 맞춘 현미경. 출처 : Pixabay.com
침지 오일은 100X 대물 렌즈에만 사용됩니다. 그렇기 때문에 100X 대물 렌즈를 몰입 형 대물 렌즈라고도합니다. 나머지는 건조 대상으로 알려져 있습니다. 이 렌즈는 침지 오일 없이는 사용할 수 없습니다. 그 이유는 시각화가 만족스럽지 않기 때문입니다.
이머젼 오일의 주요 기능은 다른 렌즈로는 불가능한 세부 사항을 관찰 할 수 있도록 더 선명하고 선명하며보다 명확한 이미지를 제공하는 것입니다.
이 목적으로 사용 된 첫 번째 오일은 Giovanni Battista Amici가 만든 첫 번째 침지 렌즈와 함께 사용 된 아니스 오일이었습니다. 이것은 색수차를 방지 할뿐 렌즈 시스템의 개구 수를 증가 시키지는 않았습니다.
그런 다음 삼나무 기름이 사용되었지만 사용을 강제하는 많은 단점이있었습니다. 그중에는 산도가 높아 단기간에 목표물이 손상되었습니다.
그 후 합성 침지 유가 생성 될 때까지 물과 글리세린과 같은 다른 물질이 사용되었으며, 이는 유기 물질의 복합 화합물 인 현재 침지 유에 도달 할 때까지 조금씩 정제되었습니다.
침지 오일의 구성
액침 오일은 터 페닐, 수소화 터 페닐, 천연 탄화수소 및 폴리 부텐과 같은 유기 화합물의 혼합물로 구성됩니다.
침지 오일 특성
침지 오일 특이한 냄새와 연 황색 액체, 외관상 약간의 점성, 및 0.99 g / cm 0.92 사이의 밀도 3 .
침지 오일 은 물에 용해되지 않으며 끓는점은 340 ° C입니다. 굴절률 a (n 20 ° C / D) : 1.482-1.516 범위입니다. 한편, 플래시 지수는 110 ° C이고 점도는 100 ~ 120mPa.s입니다.
이 제품은 생태 독성이 있으므로 적절히 폐기해야합니다. 즉, 주로 수생 동물에 영향을 미치는 환경에 해 롭습니다. 반면에 피부와 점막을 자극합니다. 섭취하면 신 독성 및 심장 독성이 있습니다.
침지 오일은 보관해야하는 온도 인 15 ~ 25 ° C에서 안정적입니다.
침수 오일 기본 사항
고배율 렌즈를 사용할 때는 빛의 강도를 높여야합니다. 그러나 많은 광선이 공기 (커버 슬립과 렌즈 사이의 공간)에 도달 할 때 산란되고 일부 광선도 완전히 반사되기 때문에 손실됩니다.
침지 오일은 유리와 유사한 굴절률을 가지고 있습니다. 따라서 오일이 100X 렌즈와 커버 슬립 사이에 접촉하면 광선이 집중됩니다.
집중된 광선은 샘플을 통과하여 이미지를 선명하게합니다. 즉, 대물 렌즈의 개구 수를 늘리고 색수차와 구면 수차를 보정합니다.
용도 또는 응용
진단에 필수적인 세부 사항을보기 위해 최고 배율 대물 렌즈 (100X 대물 렌즈)를 사용하여 더 넓은 방식으로 이미지를 관찰해야 할 때 특히 침지 오일을 사용해야합니다.
따라서 조직학, 세포학, 혈액학 및 세균학과 같은 다양한 분야의 현미경 연구에 널리 사용됩니다. 예를 들어, 환자의 세포와 조직의 특성을 연구하는 데 유용합니다.
또한 적혈구 내부 및 외부의 혈액 기생충의 특성을 자세히 설명하고 그람 제제에서 미생물의 형태 형성 특성을 정의하려는 혈액 도말 분석에도 사용됩니다.
신선한 준비에는 권장되지 않기 때문에 일반적으로 고정 준비에 사용됩니다. 이는 오일의 표면 장력으로 인해 커버 슬립이 이동하여 관찰 중에 샘플이 이동하여 분석을 방지하기 때문입니다.
반면에, 침지 오일은 기존의 광학 현미경 검사에서만 유용 할뿐만 아니라 내부 전반사 형광 (TIRFM) 현미경 및 공 초점 형광 응용 분야에서도 사용됩니다.
침지 오일을 사용하여 준비를 관찰하는 단계
현미경으로 슬라이드를 보려면 먼저 낮은 광도의 가장 낮은 배율 (일반적으로 10X)에 초점을 맞춰야합니다.
그런 다음 40X 대물 렌즈로 이동하고 광 경로가 약간 증가합니다. 이 배율로 일부 분석을 수행 할 수 있지만 구조적 세부 정보를 보려면 100 배 배율이 필요합니다.
100X 대물 렌즈로 이동하기 전에 관찰하고자하는 곳 바로 커버 슬립에 침지 오일 한 방울을 놓은 다음 현미경 터렛을 이동하여 준비물에서 100x 대물 렌즈를 찾습니다.
빛의 강도는 조절 (증가)됩니다 (콘덴서를 이동하고 다이어프램을 열어). 그런 다음 현미경이 parafocal 대물 렌즈를 사용하는 경우 마이크로 미터 나사를 약간만 움직여 (앞으로 또는 뒤로) 완벽하게 초점을 맞 춥니 다.
몰입 형 렌즈로 프렙에 직접 초점을 맞추려고하면 초점을 찾는 데 어려움이있을 수 있습니다. 불가능한 행동은 아니지만 난이도가 크게 증가합니다.
케어
침지 오일을 사용하려면 특정 조건을 고려해야합니다.
Giemsa 또는 Gram으로 얼룩진 얼룩과 같은 유색 준비가 완료되면 얼룩이 완전히 마를 때까지 기다렸다가 오일을 담그십시오. 그렇지 않으면 물과 함께 기름이 미셀을 형성하여 조제 물이 보이지 않게합니다.
다른 한편으로, 준비 배치를 관찰 한 후, 즉 작업 일이 끝나면 100X 대물 렌즈는 에탄올이 든 렌즈 용지를 사용하여 조심스럽게 청소해야합니다. 렌즈가 더러워지면 오일이 마르고 제거하기가 매우 어려워 시야가 손상됩니다.
마찬가지로 오일이 가연성이며 열원 (라이터)에서 멀리 떨어져 있어야한다는 점을 고려해야합니다. 65 ° C 이상으로 가열하지 않는 것이 중요합니다.
마지막으로 기름은 독성이있는 제품입니다. 따라서 피부 및 점막과의 직접적인 접촉은 피해야하며 약간의 자극을 유발할 수 있습니다. 사고를 방지하기 위해 장갑과 보안경의 사용을 권장합니다.
기름에 닿은 경우에는 물로 충분히 씻어야합니다. 기름이 눈에 튀어 나오면 눈을 뜨고 똑같이 씻어야한다. 우연히 섭취 한 경우에는 가까운 의사에게가는 것 외에도 따뜻한 물을 마시고 구토를 유도하는 것이 중요합니다.
참고 문헌
- "전체 내부 반사 형광 현미경." Wikipedia, The Free Encyclopedia. 2018 년 12 월 30 일, 22:46 UTC. 2019 년 05 월 14 일 01:54
- IVD. 현미경 오일 침지. 사용 가능 : 사용자 / 팀 / 다운로드.
- 환경 생물학 및 미생물학. 광학 현미경의 작동. 이용 가능 : eumed.net/libros.
- 산체스 레라 리타 마리아, 올리바 가르시아 닌파 로사. 현미경의 역사와 미생물학에 미치는 영향. Rev Hum Med, 2015; 15 (2) : 355-372. 사용 가능 : scielo.
- Herrero J. Practice No. 1 : 일반 복합 광학 현미경의 기초 및 사용. Universitat d´Alacant 이용 가능 : rua.ua.es/dspace
- Scharlau-MSDS. 현미경 검사 용 침지 오일. 2001. 이용 가능 : insumos-labcentral.