한천 베어드 후드 고체 배지 선택적 및 차동 배양한다. 응고 효소 양성 포도상 구균 (Staphylococcus aureus)의 검출 및 계수를 위해 1962 년에 만들어졌습니다.
카제인의 췌장 가수 분해물, 육류 추출물, 효모 추출물, 염화 리튬, 글리신, 피루브산 나트륨, 텔루르 산 칼륨, 한천 및 난황 에멀젼으로 구성됩니다.
Baird Parker 한천의 전형적인 Staphylococcus aureus 집락. 출처 : Daizy John
Baird Parker Agar는 S. aureus가 텔루 라이트를 줄이고 레시 티나 제를 생성하는 능력을 기반으로합니다. 두 속성 모두이 종에 대한 특정 특성을 가진 식민지를 생성합니다. 따라서이 미생물 검출에 매우 효과적입니다.
S. aureus의 전형적인 집락은 검은 색 또는 짙은 회색이며 무색 테두리와 주변을 둘러싼 밝은 후광이있어 다른 미생물과 구별됩니다. 이 병원균은 임상 샘플, 물, 화장품, 날것 또는 조리 된 식품에서 찾을 수 있습니다.
식중독, 화상 피부 증후군, 독성 쇼크 증후군, 농양, 수막염, 패혈증, 심내막염과 같은 다양한 병리로 인해 진단 또는 발견이 가장 중요합니다.
기초
영양 력
카제인의 췌장 가수 분해물, 육류 추출물 및 효모 추출물은 일반적인 미생물 발달에 필요한 영양소, 비타민 및 미네랄의 원천이며, 피루 베이트와 글리신은 황색 포도상 구균의 특정 성장에 유리한 화합물입니다.
선택적
Baird Parker Agar는 S. aureus의 발달을 촉진하는 동시에 동반 식물의 성장을 억제하는 물질을 포함하고 있기 때문에 선택적입니다. 억제 화합물은 염화 리튬과 텔루르 산 칼륨이다.
미분
이 배지는 S. aureus를 나머지 coagulase 음성 포도상 구균과 구별하는 것을 가능하게합니다. S. aureus는 텔루 라이트를 금속성 흑색 텔 루륨으로 환원시켜 검은 색 또는 짙은 회색의 집락을 형성합니다.
마찬가지로, 난황은 효소 레시 티나 아제 및 리파아제의 존재를 입증하는 기질을 제공합니다. S. aureus는 레시 티나 제 양성이므로 콜로니 주변에 명확한 후광이 관찰되어 레시틴이 가수 분해되었음을 나타냅니다.
이런 의미에서이 한천에 밝은 후광이있는 광택이 나는 검은 색 또는 짙은 회색 집락의 모습은 S. aureus의 존재를 나타냅니다.
침전 영역이 형성되면 리파아제 활성을 나타냅니다. S. aureus의 일부 균주는 리파아제 양성이고 다른 균주는 음성입니다.
S. aureus가 리파아제 양성인 경우, 검은 색 또는 짙은 회색 집락 주변에서 불투명 한 부분이 관찰되고 레시 티나 아제의 작용으로 밝은 후광이 뒤 따릅니다.
이 배지에서 성장할 수있는 S. aureus 이외의 박테리아 콜로니는 주변 후광이없는 무색 또는 갈색 콜로니로 발전합니다.
무색 경계선이 있거나없는 비정형적인 검은 색 집락도 볼 수 있지만 밝은 후광은 없습니다. 이 콜로니는 고려되어서는 안되며 S. aureus와 일치하지 않습니다.
예비
난황 에멀젼
신선한 닭고기 달걀을 잘 씻어서 70 % 알코올에 2 ~ 3 시간 동안 두십시오. 그런 다음 계란을 무균으로 열고 흰색을 노른자에서 조심스럽게 분리합니다. 그 후, 50ml의 노른자를 취하고 50ml의 멸균 생리 용액과 혼합한다.
텔루르 산 칼륨 1 % w / v
일부 상업용 주택은 바로 사용할 수있는 1 % 텔루르 산 칼륨을 판매합니다. 매체가 고형화되기 전에 매체에 추가됩니다.
실험실에서이 용액을 준비하기 위해 1.0g의 텔루르 산 칼륨을 칭량하고 물의 한 부분에 용해시킵니다. 그 후, 물의 양은 100ml에 도달 할 때까지 완료됩니다. 용액은 여과 방법으로 멸균해야합니다.
배양 배지 준비
탈수 배지 60g을 달아 증류수 940ml에 녹인다. 혼합물을 약 5-10 분 동안 그대로 두십시오.
용해 과정을 개선하기 위해 매체를 자주 저어 열을가하십시오. 잠시 끓으십시오. 오토 클레이브에서 121 ° C에서 15 분 동안 살균합니다.
45 ° C가 될 때까지 방치하고 난황 에멀젼 50ml와 1 % 텔루 라이트 10ml를가한다. 잘 섞어 멸균 된 페트리 접시에 15-20ml를 붓습니다.
단단하게 굳히고, 뒤집어서 플래 커로 주문하고 사용할 때까지 냉장고에 보관하십시오.
준비된 배지의 최종 pH는 6.8 ± 0.2 여야합니다.
샘플을 파종하기 전에 플레이트가 실온에 도달 할 때까지 기다리십시오. 줄을 긋거나 Drigalski 주걱으로 표면을 뿌려 접시에 씨를 뿌립니다.
탈수 배지의 색상은 연 황갈색이고 준비된 배지의 색상은 연 황색입니다.
사용하다
임상 샘플
임상 샘플을 직접 파종하여 판의 한쪽 끝에서 재료의 일부를 배출하고 거기에서 피로로 줄무늬가 생깁니다. 35 ~ 37 ° C에서 24 ~ 48 시간 동안 배양합니다.
식품 샘플
음식 샘플 10gr의 무게를 달고 0.1 % 펩톤 물 90ml에서 균질화합니다. 필요한 경우 희석액이 준비됩니다. 준비된 용액 0.3 ml로 플레이트를 3 중으로 접종하고 Drigalski 주걱으로 표면별로 씨를 뿌립니다. 35 ~ 37 ° C에서 24 ~ 48 시간 동안 배양합니다.
이 방법론은 얻은 전형적인 콜로니를 계산할 수 있으며 S. aureus의 존재가 샘플 g / ml 당 10 CFU 이상으로 의심 될 때 이상적입니다.
S. aureus의 양이 적거나 수반되는 식물상이 많은 것으로 의심되는 경우 트립 티 타제 대두 국물에 10 % NaCl과 1 % 나트륨 피루 베이트를 첨가하여 시료를 농축하는 것이 좋습니다. 이것은 S. aureus의 성장을 촉진하고 수반되는 식물상의 발달을 억제합니다. 탁한 튜브는 Baird Parker 한천에 시드됩니다.
물 샘플
멸균 된 진공 여과 시스템에서 100ml의 연구 용수를 여과하고이어서 0.4 미크론 미세 다공성 막을 멸균 집게로 제거하고 Baird Parker 플레이트에 놓습니다. 35 ~ 37 ° C에서 24 ~ 48 시간 동안 배양합니다. 이 기술은 전형적인 S. aureus 집락의 계수를 허용합니다.
QA
Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 또는 Proteus mirabilis ATCC 43071과 같은 알려진 균주를 사용하여 Baird Parker 한천의 품질을 평가할 수 있습니다.
S. aureus ATCC 균주의 경우 텔루 라이트를 감소시키는 것으로 알려져 있으며 리파아제와 레시 티나 아제 양성이다. 따라서 만족스러운 개발이 있어야하며 중앙이 검은 색이고 테두리가 무색이며 불투명 한 후광과 가장 바깥 쪽이 밝은 후광이있는 볼록한 식민지가 성장해야합니다.
부분적으로 S. epidermidis는 밝은 후광없이 갈색 회색에서 검은 색 집락으로이 배지에서 잘 발달하지 않을 것으로 예상됩니다.
E. coli 및 P. mirabilis의 경우 전체 또는 부분적으로 억제 될 것으로 예상됩니다. 성장의 경우 불투명 한 영역이나 밝은 후광없이 갈색 집락이 발생합니다.
추천
-텔루 라이트와 달걀 노른자를 첨가 한 후 배지를 가열하지 마십시오.
-난황 에멀젼을 준비하고 중간에 첨가하는 것은 오염에 매우 취약한 단계입니다. 극도의주의가 필요합니다.
-S. aureus의 전형적인 콜로니가 존재하는 경우 해당 균주에 coagulase test를 장착하여 확인해야합니다.
-응고 효소로 의심스러운 결과가있을 경우 다른 확인 검사를 실시해야합니다.
-전형적인 S. aureus 집락과 비정형 검은 색 집락을 혼동하지 않도록주의하십시오.
참고 문헌
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