세트 리마 이드 한천 또는 세트 리마 이드는 녹농균의 분리를 위해 설계된 선택적 고체 배지이다. 그것은이 종의 특징적인 안료의 생산을 보여주는 것을 기반으로하며 King, Ward 및 Raney가 만든 Tech agar의 변형으로 만들어졌습니다.
원래 공식에는 염화 마그네슘 염, 황산 칼륨, 젤라틴의 췌장 소화 및 한천이 포함되었습니다. 공식의 변형은 cetrimide (cetyl trimethyl ammonium bromide)와 글리세롤의 첨가로 구성되었습니다.
Pseudomonas aeruginosa로 시드 된 Cetrimide 한천 출처 : BiotechMichael, from Wikimedia Commons
Cetrimide agar는 Pseudomonas aeruginosa의 존재가 의심되는 샘플의 미생물 학적 연구에 유용합니다. 이 박테리아는 정상적인 환경 미생물 군의 일부이지만 기회 주의적 병원균으로 자주 행동하기 때문에 매우 중요하다는 점에 유의해야합니다.
이러한 이유로이 세균이 일으키는 가장 흔한 문제 중 하나는 병원 내 감염, 즉 면역 체계가 저하 된 환자를 공격하는 병원 환경에서 발생하는 감염입니다.
반면에,이 미생물은 습도와의 친화력으로 인해 가장 취약한 오염 대상은 호흡 보조 장비, 의약품, 분무기, 수원, 에어컨, 소독제, 비눗물, 주사 용액, 열린 상처입니다. , 카테터, 요로 튜브 등.
이러한 의미에서 cetrimide agar는 이전에 언급 된 요소에 대한 미생물 학적 제어 및 배양을 수행하는 데 유용합니다.
기초
Cetrimide agar는 P. aeruginosa의 성장을 촉진하고 색소 생산을 촉진하며 다른 미생물의 성장을 억제하는 배지의 능력에 기반합니다.
이러한 속성은 각 구성 요소의 기능 때문입니다. 존재하는 젤라틴 펩톤은 질소, 비타민 및 미네랄 공급원 역할을합니다. 글리세롤 또는 글리세린은 탄소원으로 작용합니다.
부분적으로, cetrimide (cetyl trimethyl ammonium bromide)는 같은 속에 속하는 다른 종을 포함하여 P. aeruginosa 이외의 박테리아의 성장을 억제하는 물질입니다.
억제는 cetramide가 양이온 성 세제로 작용하여 P. aeruginosa 및 생존을 관리하는 일부 박테리아를 제외한 대부분의 박테리아의 원형질막을 불안정하게하기 때문에 발생합니다.
반면에 염화 마그네슘과 황산 칼륨이 포함되어 있습니다. 이 화합물은 Pseudomonas aeruginosa가 pyocyanin, pyoverdin, pyorrubin, pyomelanin 및 fluorescein을 포함한 다양한 색소를 생산하는 능력과 관련된 표현형 발현을 자극합니다. 마지막으로 한천을 포함하여 견고한 일관성을 제공합니다.
해석
이 한천에서 얻은 성장의 해석은 다음과 같이 수행됩니다.
청록색, 녹색, 갈색 또는 붉은 색 안료가 생성되고 과일 냄새 (아미노 아세토 페논)가 방출되는 규칙적인 모서리를 가진 둥글고 매끄러운 집락의 관찰은 상기 샘플에서이 박테리아의 존재에 대한 추정 결과입니다.
반면에, 집락에서 밝은 황록색 색소가 관찰되면 판이 자외선에 노출되었을 때 P. aeruginosa를 나타냅니다.
자외선 하에서 cetrimide 한천에 P. aeruginosa 식민지의 형광.
관찰되는 각 색상은 특정 안료의 생성으로 인한 것입니다. 청록색 안료는 pyocyanin, 녹색에서 pyoverdin으로, 붉은 색에서 pyorubin으로, 갈색에서 pyomelanine으로, 자외선 아래에서 밝은 황록색 형광에서 플루오 레세 인으로의 생산에 해당합니다.
예비
43g의 탈수 배지를 달아 증류수에 녹입니다. 글리세롤 10ml를 추가합니다. 혼합물을 열원으로 가져갑니다. 완전히 용해 될 때까지 몇 분 동안 끓입니다.
121 ° C에서 15 분 동안 오토 클레이브합니다. 온도가 약 50 ° C 일 때 서서 멸균 페트리 접시에 담아 제공합니다.
고형화, 반전, 플라크로 주문하고 사용할 때까지 냉장고에 보관하십시오. Cetrimide 한천 플레이트는 파종하기 전에 냉장고에서 제거하고 실온에 두어야합니다.
배지의 최종 pH는 7.2 ± 0.2 여야합니다.
탈수 된 배지의 색상은 베이지 색이고 조제 물은 불투명 한 흰색입니다.
응용
녹농균 (Pseudomonas aeruginosa)의 존재가 의심되는 모든 종류의 샘플은 cetrimide agar에 뿌릴 수 있습니다. 따라서 미생물학의 모든 영역 (환경, 산업, 임상, 물 및 식품)에서 유용합니다.
이 미생물은 환자가 사용하는 오염 된 장비, 의약품, 용액 및 소모품을 통해 환자에게 도달하기 때문에 병원 환경을 분석하여 교정 조치를 적용 할 수있는 것이 매우 중요합니다.
이런 식으로 미생물은 면역 억제 환자의하기도, 요로 및 상처를 감염시킬 수 있습니다.
P. aeruginosa의 집락 수는 미생물 한계 테스트에서도 수행 할 수 있습니다.
뿌리다
Cetrimide agar는 1 차 배양으로 사용할 수 있습니다. 플레이트는 가장자리 중 하나에 접종되고 거기서부터 나머지 플레이트로 고갈되어 배포됩니다. 액체 샘플은 drigalski spatula로 표면에 뿌릴 수 있습니다.
플레이트는 배양 24 시간 동안 37 ° C에서 호 기적으로 배양됩니다.
한계
-Pseudomonas aeruginosas 균주의 일부는 pyocyanin을 생성하지 않으므로 위음성으로 해석 될 수 있습니다.
-임상 적으로 중요한 일부 슈도모나스 종은이 배지에서 억제됩니다.
-녹농균 (Pseudomonas aeruginosa)에 대해 설명 된 특성을 관찰 했음에도 불구하고 추가 식별 테스트를 통해 입증되어야합니다. 놓쳐서는 안되는 검사는 산화 효소 검사입니다. 양성이어야합니다.
-일부 장내 세균과는이 배지에서 자랄 수 있고 노란색 색소를 낼 수 있지만, 녹농균과는 플레이트가 자외선을 받으면 형광이 없다는 점에서 다릅니다.
-Serratia marcescens는 분홍색 안료를 개발하고 생산합니다.
-cetrimide agar를 시드 한 plate를 상온에서 일정 시간 노출 시키면 P. aeruginosa 균주는 자외선에서 관찰되는 형광을 잃을 수 있으나 37 ° C에서 다시 배양하면 물성이 회복된다.
QA
cetrimide agar의 우수한 성능을 분석하기 위해 Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 및 Staphylococcus aureus ATCC 25923과 같은 대조군 균주를 사용할 수 있습니다.
예상되는 결과는 다음과 같습니다.
- 청록색 색소와 양성 플루오 레세 인으로 P. aeruginosa의 좋은 성장.
- S. maltophilia 및 S. aureus는 부분적으로 완전히 억제됩니다.
- 대장균은 완전히 억제 될 것으로 예상됩니다.
참고 문헌
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