초콜릿 한천 : 기초, 용도 및 준비 - 생물학 - 2026

초콜릿 한천 고체 배지, 농축, 비입니다 - 선택적 비 - 차동. 어떤 종류의 박테리아도 자랄 수 있지만 영양 학적 관점에서 요구되는 미생물의 분리에 주로 사용됩니다.

이러한 이유로 CSF 및 관절액과 같이 일반적으로 멸균 된 샘플의 파종에서 특히 유용성이 증가합니다. 다중 미생물 샘플을 파종하기 위해 선택한 수단에도 포함되지만 이러한 경우 수반되는 식물상을 억제하는 항생제를 추가해야합니다.

박테리아 성장이있는 초콜릿 한천

이 매체는 초콜렛과 매우 유사한 특징적인 갈색을 띠므로 그 이름이 있습니다. 준비는 혈액 한천의 준비와 매우 유사하며,이 경우에만 적혈구가 분해되기 위해 혈액을 가열해야합니다.

혈액 한천과 같이 그것의 준비는 쉽게 오염되기 때문에 매우 섬세합니다. 이러한 이유로 많은 실험실에서는 품질을 보장하는 상업 회사에서 이미 준비한이 매체를 구입하는 것을 선호합니다.

기초

이 배지는 영양이 풍부한 한천베이스와 가열 된 혈액으로 구성됩니다. 적혈구의 용혈은 헤모필루스 속과 같은 일부 미생물의 성장에 필요한 인자 X (헤민) 및 인자 V (NAD)를 제공합니다. Neisserias sp.의 분리에도 매우 유용합니다.

blood agar와 마찬가지로 필요에 따라 다른 배지를 base agar로 사용할 수 있습니다. 사용 된 매체 중에는 뇌 심장 주입 및 트립 티카 제 콩 한천이 있지만 가장 권장되는 것은 Columbia 한천, Müeller Hinton, GC 한천 및 Thayer Martin 한천입니다.

초콜릿 한천의 일부 변형에는 Isovitalex 또는 Polivitex라는 상업적으로 사용 가능한 강화 보충제가 포함됩니다.

이러한 보조제는 비타민 B 함유 ₁₂ , L 글루타민, 아데닌, 구아닌 클로라이드, p- 아미노 산, 니코틴 아미드 아데닌 디 뉴클레오티드 (NAD)를 티아민 피로 인산, 질산 철, 티아민 염산염, 시스테인 염산염, L- 시스틴 및 글루코스.

초콜렛 한천이 혈액 한천보다 더 풍부하지만 용혈 패턴을 관찰 할 수 없다는 점에 유의하는 것이 중요합니다.

응용

출처 : pixnio.com. 저자 :
Pete Seidel, Amanda Moore, MT, Todd Parker, PhD, Audra Marsh, USCDCP

컬럼비아 한천으로 만든 초콜릿 한천

이 배지에는 카제인과 심장의 췌장 소화, 고기의 소화 소화, 염화나트륨, 한천, 효모 추출물 및 옥수수 전분이 포함되어 있습니다. 또한 비타민, 미네랄 및 필수 아미노산이 풍부합니다.

이 가열 된 혈액 기반은 Neisseria 속의 박테리아 분리에 이상적입니다. 한편, 브루셀라에 대한 보충제를 배지에 추가하면 언급 된 미생물을 분리 할 수있다. 말의 피를 사용하여 결과가 향상됩니다.

GC베이스 한천으로 준비한 초콜릿 한천 (임균용)

이 배지에는 펩톤, 옥수수 전분, 1 염기 및 2 염기 완충액, 염화나트륨 및 한천이 포함되어 있습니다.

대부분의 상업적으로 준비된 초콜릿 한천 프레젠테이션은이 염기와 함께 제공되며 가열 된 혈액을 포함하지 않고 오히려 헤민의 합성 혼합물과 성장 인자, 비타민, 미네랄, 아미노산, 인자 V 및 포도당의 화학적 보충제입니다.

Müeller Hinton 한천으로 준비한 초콜릿 한천

5 % 가열 된 양의 피를 사용하여 Streptococcus pneumoniae와 같은 까다로운 미생물의 항균 감수성을 테스트하는 데 사용됩니다.

또한 Neisserias 및 Haemophilus의 1 차 분리에도 사용되지만 Haemophilus 분리의 경우에는 말혈이 인자 X 및 V의 풍부한 공급원이기 때문에 선호됩니다.

반면에 파종 할 검체가 비 멸균 지역에서 나온 경우 항생제를 추가하여 해당 지역의 정상적인 세균총을 억제하는 것이 좋습니다.

헤모필루스 속 박테리아의 존재가 의심되는 호흡기 샘플의 예는 바시 트라 신을 사용하여 포도상 구균, 마이크로 코커스, 스트렙토 코커스 및 부 균성 나이 세리아의 성장을 억제합니다.

Haemophilus ducreyi가 의심되는 생식기 chancre 샘플의 경우, 다음과 같이 준비된 초콜릿 한천이 성공적으로 사용되었습니다. µg / ml 반코마이신.

Thayer Martin 한천으로 만든 초콜릿 한천

이 매체는 Neisseria gonorrhoeae의 분리를 위해 특별합니다. 수반되는 식물상을 억제하기 위해 항생제를 포함해야합니다. 어린 양의 피가 사용됩니다.

예비

사용할베이스 한천의 준비에 대한 적응증을 확인해야합니다. 탈수 배지 용기 뒷면에 있습니다. 일반적으로 1 리터의 배양 배지를 준비하기 위해 체중이 얼마나되는지 설명합니다.

필요한 정확한 양은 실험실에서 준비 할 수 있으며 1 리터보다 많거나 적을 수 있습니다.

계산

원하는 부피를 준비하기 위해 무게를 계산하는 데 세 가지 규칙이 사용됩니다. 예:

1 리터의 경우 40 gr의 무게가 필요하고 실험실에 800ml가 필요한 경우 다음과 같이 말합니다.

1000ml ----------- 40gr

800ml -----------– X

공식은 다음과 같습니다.

X = 32gr (800ml에 대해 칭량 할 양).

무게 및 용해

필요한 양의 무게를 재고 물이 담긴 플라스크에 넣습니다.

적당한 불로 가열하고 탈수 된 배지가 완전히 녹을 때까지 회전 운동으로 부드럽게 혼합하여 1 분 동안 끓입니다.

살균

플라스크를 오토 클레이브에 놓고 121 ° C에서 20 분 동안 배지를 멸균합니다.

혈액 응집체

오토 클레이브를 떠날 때 배지의 온도가 약 56 ~ 70 ° C가 될 때까지 두어 혈액을 넣고 배지가 갈색으로 변할 때까지 혼합합니다.

보충제를 추가하는 경우 지금이해야 할 때입니다. 그 후 각 멸균 페트리 접시에 20ml를 섞어 제공합니다.

전체 절차는 층류 후드 또는 분젠 버너 주변에서 수행되어야합니다.

굳을 때까지 서서 냉장고에 거꾸로 보관하십시오.

혈액을 사용하지 않고 초콜릿 한천을 준비하는 또 다른 방법

상기 기재 한 바와 같이베이스 배지를 제조하고, 시판되고있는 탈수 헤모글로빈을 오토 클레이브에서 용해 및 살균한다.

두 용액을 모두 50 ° C로 식히고 결합하고 보충제를 추가합니다. 무균 상태에서 혼합 한 다음 멸균 페트리 접시에 제공합니다.

QA

적혈구를 용해하는 동시에 온도에 민감한 인자 V를 유지하는 것이 이상적인 혈액이므로 지정된 온도에 혈액을 두는 것이 중요합니다.

한천 표면에 기포가 남아 있으면 안됩니다. 100 개 플레이트의 각 배치에서 하나 또는 두 개의 플레이트를 37 ° C 오븐에서 24 시간 동안 배양하여 멸균 성을 확인해야합니다.

최상의 결과를 위해 초콜릿 한천은 준비 직후에 사용해야합니다.

임상 적으로 중요한 까다로운 주요 미생물의 성장에 대한 신선한 배지의 효능을 평가하기 위해 대조군 박테리아 균주를 실험실에 보관해야합니다.

참고 문헌

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