옥수수 가루 한천 : 배경, 준비 및 사용 - 생물학 - 2025

옥수수 가루 한천은 특정 곰팡이의 계대 배양 및 칸디다 알비 칸스 복합 균주의 후막 포자를 입증하는 데 유용 고체 배지, 낮은 영양 전력이다. 영어로는 Corn Meal Agar로 ​​알려져 있습니다.

기존의 옥수수 가루 배지는 매우 단순한 구성을 가지고 있으며 옥수수 가루, 한천 및 물을 포함합니다. 영양 수준이 낮기 때문에 적당한 기간 동안 곰팡이 균주, 특히 검은 곰팡이를 유지하는 데 이상적입니다.

A. 옥수수 가루 한천에있는 Candida albicans Complex의 그래픽 표현. B. 옥수수 가루 한천에 형성된 칸디다 알비 칸스 복합체의 클라 미도 포자 현미경으로 관찰. 출처 : A. GrahamColm / B. 작성자 : CDC / Dr. William Kaplan, 제공 : 공중 보건 이미지 라이브러리.

한천을 준비하는 동안 Tween 80의 1 %를 첨가하면 칸디다 알비 칸스 복합체의 포자 형성이이 배지에서 선호됩니다. 클라 미도 포자의 형성은이 종의 특징이며 실제로 인간에게 영향을 미치는 유일한 종입니다.

클라 미도 포자를 형성하는 다른 종들도 있지만, 펭귄 배설물에 존재하는 Candida australis 또는 드물게 발견되는 부 영양제 인 C. clausenii와 같이 인간에게 영향을 미칠 가능성은 거의 없습니다. 마찬가지로, 예외적으로 종 C. stellatoidea와 C. tropicalis가 그들을 형성 할 수 있습니다.

다른 한편으로, 옥수수 가루 배지에 포도당을 첨가하면 Trichophytom rubrum 균주에서 색소 형성에 유리합니다.

다른 속과 다른 크립토 코 쿠스 네오 포르 만 스와 같은 옥수수 가루 한천에서 균사 또는가 균사를 형성하지 않는 진균이 있다는 점에 유의하는 것이 중요합니다.

옥수수 가루 한천은 가정에서 실험실에서 만들 수 있으며 상업적 매체도 사용할 수 있습니다.

기초

옥수수 가루는 기질이고 한천은 응고제이며 물은 용매입니다.

옥수수 한천에는 트윈 80 (솔비 탄 모노 올레 에이트 또는 폴리 소르 베이트 폴리 에스터 80)을 보충 할 수 있습니다. 이 화합물은 유화력으로 인해 매체의 표면 장력을 감소시킵니다.

그것은 또한 과장된 세포 증식을 억제하고 균사의 성장을 자극하는 적대적인 환경을 만들고 또한 클라 미도 포자의 생산을 선호합니다. 후자는 저항 구조를 고려했습니다. 이 구조는 Candida albicans 종의 식별에 도움이됩니다.

그 부분에서이 배지의 포도당은 일부 곰팡이의 색소 형성 능력을 증가시킵니다.

포도당을 함유 한 옥수수 가루 배지는 칸디다 알비 칸스 복합체에서 클라 미도 포자 입증에 유용하지 않다는 점에 유의해야합니다.

예비

집에서 만든 옥수수 한천 준비

노란 옥수수 가루 47g을 달아 증류수 500ml에 녹인다. 약 1 시간 동안 준비를 저으면서 60ºC로 가열합니다. 그런 다음 거즈와면 조각을 통해 여과하고, 선택적으로 Whatman No. 2 여과지를 통과 시켜서 다시 여과 할 수 있습니다.

증류수로 부피를 1000ml로 만듭니다. 한천 17g을 넣고 녹을 때까지 가열합니다. 121ºC에서 15 분 동안 오토 클레이브합니다.

멸균 페트리 접시에 담으십시오. 냉장고에 보관하십시오.

준비된 배지의 색상은 희끄무레하고 울퉁불퉁합니다.

위에서 설명한 준비에 포도당으로 옥수수 가루를 준비하려면 포도당 10g을 추가하십시오.

상업용 옥수수 가루 한천

탈수 배지 17g을 달아 증류수 1 리터에 녹인다. 혼합물을 가열하고 부드럽게 흔들어 완전히 용해시킬 수 있습니다. 121 ºC, 15 lb, 15 분 동안 오토 클레이브에서 멸균하십시오.

멸균 페트리 접시에 붓습니다. 응고하자. 뒤집어서 사용할 때까지 냉장고에 보관하십시오. 사용하기 전에 성미.

pH는 25ºC에서 6.0 ± 0.2 여야합니다.

Tween 80을 포함한 옥수수 가루 한천

ISO 18416을 준수하려면 옥수수 한천을 다음과 같이 준비해야합니다.

리터당 65g의 무게를 달고 10ml의 트윈 80을 추가합니다. 너무 과열되지 않도록주의하면서 녹을 때까지 몇 분간 가열하고 끓입니다. 121ºC에서 15 분 동안 살균합니다.

포도당과 옥수수 가루 한천

Trichophyton rubrum 콜로니의 발색력을 향상시키고 T. mentagrophytes와 구별하기 위해 0.2 % 포도당을 원래의 공식에 첨가 할 수 있습니다. 포도당은 클라 미도 포자 형성을 억제하므로 트윈 80이 필요하지 않습니다.

사용하다

주로 옥수수 한천의 사용은 칸디다 균주의 연구를위한 것이며, 알비 칸스 종에서 클라 미도 포자의 특징적인 관찰을 통해 식별을 돕습니다. 즉,이 한천의 사용은 이러한 효모를 식별하는 보조 방법으로 사용됩니다.

이 한천에서 부영 양성 및 병원성 종이 모두 발생할 수 있지만 각각은 특징적인 균사 구조를 형성합니다. 예를 들어, Torulopsis 속의 종은 균사체를 생산하지 않고 배반포에 의해서만 번식합니다.

마찬가지로, Trichosporon과 Geotrichum 종은 옥수수 가루 한천에 절분 생포자를 생산하며 때로는 하나와 다른 것을 구별하기가 어렵습니다.

Geotrichum 속의 Arthroconidia는 하키 스틱과 유사한 균사의 연장을 생성합니다.

또한 포도당이 첨가 된 옥수수 가루 한천을 사용한 안료 생산은 Trichophytom rubrum을 식별하는 데 유용합니다.

뿌리다

임상 샘플, 화장품, 토양 등의 1 차 배양 배지 인 Sabouraud 한천에서 얻은 의심스러운 칸디다 식민지는 옥수수 가루 한천에서 계대 배양됩니다. 배지를 시드하고 24 ~ 48 시간 동안 22 ° C에서 배양합니다. 필요한 경우 배양 시간을 늘릴 수 있습니다.

클라 미도 포자 시연

이를 위해 Tween 80이 포함 된 옥수수 가루 한천은 Dalmau 기술을 사용하여 접종해야합니다. 이 방법은 백금 손잡이로 의심되는 식민지의 일부를 취하고 손잡이를 45º로 유지하면서 가운데에 3 개의 평행 절단을 만드는 것으로 구성됩니다. 절단은 서로 1cm의 거리를두고 분리되어야합니다.

그 후, 이전에 불을 붙인 덮개 물체를 뿌린 줄무늬 위에 놓아서 절반은 덮고 다른 하나는 덮지 않게합니다.

시드 플레이트를 30 ° C에서 48-72 시간 동안 배양 한 다음 커버 슬립을 통해 현미경으로 검사합니다.

곰팡이 균주의 유지

균주 유지를 위해 씨를 뿌리고 재배 한 판을 냉장고 (4 ~ 8ºC)에 보관합니다. 이런 식으로 몇 주 동안 지속될 수 있으며 교육 또는 연구 목적으로 사용할 수 있습니다.

QA

무균 제어를 위해 상온에서 접종하지 않고 플레이트를 배양하면 생육이나 변색이 없을 것으로 예상된다.

품질 관리를 위해 다음과 같은 알려진 균주를 파종 할 수 있습니다.

예상되는 결과는 S. aureus 및 E. coli에 대한 부분적 억제입니다. 나머지 균주에서는 만족스러운 성장이 예상됩니다.

Aspergillus niger는 약 5 일의 배양 시간에 검은 색 및 포자 형 집락으로 자랍니다.

클라 미도 포자 생산을 가진 칸디다 알비 칸스 효모 집락.

Saccharomyces cerevisiae는 큰 효모 세포를 생산합니다.

한계

식민지와 혼동해서는 안되는 노란색 침전물이 접시 바닥에 형성됩니다.

참고 문헌

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