트립 티카 제인 콩 한천 : 근거, 준비 및 사용 - 생물학 - 2026

트립 톤 대두 한천 또는 트립 토스 대두 한천 고체 배지, 영양 비 선택적이다. 영어 Trypticase Soy Agar의 두문자어 TSA로 지정됩니다. 그것은 triptein, soy peptone, sodium chloride 및 agar-agar로 구성됩니다.

영양가가 높기 때문에 적당히 까다 롭고 까다 롭지 않은 미생물의 배양에 이상적입니다. 추가 보충제가없는 배지는 1 차 배양에 권장되지 않지만, 다른 용도 중에서도 순수한 균주를 계대 배양하고 생존 가능하게 유지하는 데 매우 유용합니다.

베이클라이트 캡이있는 튜브에 트립 티카 제인 대두 한천 웨지. 출처 : 저자 MSc가 찍은 사진. Marielsa Gil.

또한이 한천은 혈액 한천과 같은 농축 배지의 준비를위한 기초 역할을하며, 특히 용혈 패턴을 관찰하고 Streptococcus pneumoniae 및 Streptococcus pyogenes의 진단에 필요한 옵토 퀸 및 바시 트라 신 분류군을 각각 장착해야하는 경우에 유용합니다.

한편, 항생제와 병용 할 경우, 혼합 식물상 샘플에서 임상 적으로 중요한 통성 및 엄격한 혐기성 미생물을 분리하는 데 유용합니다.

마지막으로 트립 티카 제인 콩 한천의 구성과 그 성능은 다른 약전 (유럽, 일본 및 북미)에서 설정 한 요구 사항을 충족합니다.

기초

박테리아의 적절한 발달을 위해서는 아미노산, 비타민, 퓨릭 및 피리 미딕 염기와 같은 에너지 공급이 필요합니다.

이러한 의미에서 트리 테인과 대두 펩톤은 이러한 영양소를 미생물에 제공하여 완전한 발달을 가능하게합니다. 그러나 까다로운 박테리아의 경우 농축을 높이기 위해이 한천에 섬유소 제거 된 혈액 또는 따뜻한 혈액을 보충해야합니다.

반면에 항생제를 배지에 첨가하면 선택적 배지가됩니다. 0.6 % 효모 추출물은 또한 Listeria 속 종의 분리를 위해 추가 할 수 있으며, 시스틴 텔루 라이트와 양의 혈액을 추가하는 것은 Corynebacterium diphteriae에 이상적입니다.

마지막으로 염화나트륨은 배지에 삼투 균형을 제공하고 한천은 단단한 일관성을 제공합니다.

예비

Trypticasein Soy Agar 플레이트

트립 티카 제인 대두 한천을 준비하려면 탈수 된 상업용 배지 40g을 디지털 저울로 칭량해야합니다. 플라스크에 담긴 증류수 1 리터에 녹입니다.

혼합물을 5 분 동안 그대로 둔 다음 열원으로 가져가 매체 용해를 돕습니다. 자주 저어주고 1 ~ 2 분 동안 끓여야합니다. 그 후, 배지는 121 ° C에서 15 분 동안 오토 클레이브에서 멸균됩니다.

50 ° C로 식히고 멸균 페트리 접시에 배포합니다. 응고, 반전, 플라크로 주문하고 냉장고에 보관하십시오.

배지의 최종 pH는 7.3 ± 0.2 여야합니다.

탈수 된 배양 배지의 색상은 밝은 베이지 색이며 건조한 장소에서 10 ~ 35 ° C 사이에 보관해야합니다.

그 부분을 위해 준비된 한천은 밝은 호박색입니다. 준비된 접시는 사용할 때까지 냉장고 (2-8 ° C)에 보관해야합니다.

플레이트는 사용하기 전에 실온에 도달해야합니다.

혈액이 보충 된 트립 티카 제인 대두 한천 플레이트

혈액 한천은 트립 티카 제인 대두 한천을 50 ° C로 냉각 할 때 5 % 탈 섬유화 된 혈액을 첨가하여 준비합니다. 혼합물은 부드러운 움직임으로 회전하여 균질화됩니다.

멸균 페트리 접시에 담으십시오. 중간 색상은 체리 레드 여야합니다.

따뜻해진 혈액으로 보충 된 트립 티카 제인 대두 한천 플레이트

TSA 기반 혈액 한천을 준비하려면 이미 설명한 절차와 동일하게 진행하지만, 오토 클레이브를 떠날 때 배지의 온도가 약 56 ~ 70 ° C가 될 때까지 휴식을 취합니다. 그 때 혈액을 넣고 배지가 갈색이 될 때까지 혼합합니다.

멸균 페트리 접시에 담으십시오. 매체의 색상은 초콜렛 브라운입니다.

Trypticasein Soy Agar Wedges

한천 준비 절차는 배양 접시에 배지를 제공하는 대신 멸균 전에 베이클라이트 덮개가있는 튜브에 10 ~ 12ml로 배포된다는 점을 제외하면 플레이트에 대해 설명한 것과 동일합니다.

그 후, 튜브를 121 ° C에서 15 분 동안 오토 클레이브합니다. 그들이 떠날 때 그들은 지원의 도움으로 기울어지고 굳어 질 수 있습니다.

준비된 쐐기는 표면적에 따라 뿌려지고 특정 비 요구 미생물을 지정된 시간 동안 생존 할 수 있도록 유지하는 역할을합니다.

응용

Trypticasein Soy Agar는 다음과 같은 경우에 사용됩니다.

-대부분의 실험실에서 일상적으로 사용되는 전형적인 혈액 한천을 준비하기위한 기초로 사용됩니다.

-까다로운 박테리아의 분리.

-용혈 패턴 관찰.

-진단 테스트 실행.

-시스틴 텔루 라이트와 양의 혈액을 함유 한 코리 네 박테 리움 디프테리아에 대한 특수 혈액 한천을 준비하는베이스로 사용됩니다.

-혐기성 세균, 특히 Bacteroides sp.의 성장을위한 kanamycin-vancomycin과 함께 lamb blood agar를 준비하는 기초로 사용됩니다.

-요구되지 않는 균주 (Bacterioteca)의 유지를 위해.

-물, 환경, 식품 및 화장품 샘플의 미생물 한계 연구에서 호기성 미생물 수.

뿌리다

샘플은 혈액 또는 기타 첨가제로 보충 된 Trypticasein Soy Agar의 표면에 직접 뿌릴 수 있습니다. 그것은 피로에 의해 뿌려집니다.

반면, 첨가물이없는 트립 티카 제인 콩 한천 플레이트는 일반적으로 미생물 균주 (박테리아 또는 효모)를 계대 배양하는 데 사용됩니다.

QA

무균 관리

Trypticasein Soy Agar로 ​​준비된 다양한 배지의 무균 상태를 확인하려면 다음을 수행하는 것이 좋습니다. 각 준비된 배치에서 1 개 또는 2 개의 미 접종 플레이트 또는 튜브를 37 ° C에서 24 시간 동안 배양하여 무균 성을 입증해야합니다. 모든 경우에 성장없이 유지되어야합니다.

오염이 발견되면 전체 배치를 폐기해야합니다.

성장 제어

트립 티카 제인 대두 한천의 적절한 기능을 연구하기 위해 다음 박테리아 균주를 사용할 수 있습니다 : Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 및 Enterococcus faecalis ATCC 29212.

균주를 파종하고 24 시간 동안 37 ° C에서 호기성 배양한다.

모든 경우에 성장이 만족 스러워야합니다.

Candida albicans Complex ATCC 10231 및 Aspergillus niger ATCC 16404와 같은 진균도 사용할 수 있으며 두 균주 모두 좋은 성장이 예상됩니다.

혈액을 첨가 한 트립 티카 제인 대두 한천의 생장 조절 및 용혈 패턴

이 염기로 준비된 혈액 한천의 적절한 기능을 확인하기 위해 다음 균주를 사용할 수 있습니다 : Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 및 Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.

그들은 씨를 뿌리고 24 시간 동안 미 호기성에서 37 ° C에서 배양합니다.

S. pyogenes에서는 베타 용혈 (콜로니 주변의 가벼운 후광)이 관찰되어야하고 S. pneumoniae의 두 균주 모두에서 알파 용혈 (콜로니 주변의 녹색 후광)이 관찰되어야한다는 점을 고려하면 모든 경우에 성장이 만족 스러워야합니다. 식민지).

참고 문헌

1. Wikipedia 기고자. Trypticase 나는 한천입니다. Wikipedia, The Free Encyclopedia. 2018 년 12 월 17 일 15:47 UTC. 사용 가능 : https://en.wikipedia.org
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