CZAPEK 한천 : 이론적 근거, 준비, 사용 및 제한 - 생물학 - 2024

을 Czapek (CZA)는 구체적 잡균 및 곰팡이의 성장을 위해 설계된 선택적 고체 배지이다. 그것은 폴란드 출신의 식물 학자 Friedrich Johann Franz Czapek과 미국 화학자 Arthur Wayland Dox에 의해 만들어졌습니다. 이러한 이유로이 한천은 Czapek-Dox 배지라고도합니다.

원래의 배지는 액체 였지만 나중에 한천을 첨가하여 고체 배지로 만들었습니다. Czapek 배지는 질산 나트륨, 인산이 칼륨, 황산 마그네슘, 염화칼륨, 황산 제 1 철, 자당, 한천 및 증류수로 구성됩니다.

Czapek 한천 A. Aspergillus parasiticus B. Aspergillus fumigatus 출처 : A. Medmyco / B. 사진 : Dr. David Midgley. Wikipedia.com

Czapek 한천의 pH는 7.3이지만 10 % 젖산을 첨가 한 변형이 있으며 그 pH는 3.5로 유지됩니다. 이 산성 배지는 호 산성 미생물의 배양에 사용됩니다.

반면에 일부 상업 주택에서는 황산 마그네슘과 인산이 칼륨을 글리세로 포스페이트로 변경하여 Czapek 한천의 조성을 변경했습니다. 이 변형은 기존 공식으로 관찰 된 인산 마그네슘 침전물이 형성되는 것을 방지합니다. 마찬가지로, 효모 추출물이 첨가되는 또 다른 변형이 있습니다.

마지막으로, Czapek 한천은 Actinomycetes sp, Aspergillus sp, Paecilomyces sp 및 Penicillium sp의 연구를 위해 미국 공중 보건 협회 APHA에서 권장합니다. 이 종은 환경 미생물 및 기회 병원균이 특징입니다.

기초

이 매체에는 자당이 포함되어 있습니다. 이 탄수화물은 탄소원으로 사용되는 반면, 질산 나트륨은 질소원이지만 다른 매체와 달리 제공된 질소는 무기물입니다.

이러한 이유로 Czapek 배지는 선택적인 것으로 간주됩니다. 무기 화합물을 유일한 질소 공급원으로 사용할 수있는 미생물 만 성장할 수 있기 때문입니다.

매체의 삼투압을 조절하는 물질은 인산이 칼륨입니다. 황산 마그네슘, 염화칼륨 및 황산 제 1 철은 부생 (자유 생활) 미생물의 성장에 필수적인 미네랄을 제공합니다. 이 공식은 인산 마그네슘의 침전물을 형성합니다.

마지막으로 agar-agar는 매체에 고체 농도를 제공하는 화합물이며 물은 모든 구성 요소의 용매입니다.

변형 된 Czapek 한천 포뮬러를 사용하면 침전물 형성이 없으며 일부 곰팡이의 성장 성능을 향상시킵니다.

Acid Czapek Agar의 극한 산도는 무기 질소를 활용할 수있는 호 산성 미생물의 성장만을 허용하는보다 선택적인 배지로 만듭니다. 한편, Czapek-yeast agar는 특정 버섯의 성능을 향상시킵니다.

예비

중간 차펙-독스

탈수 된 배양 배지 49g을 달아 증류수에 녹인다. 끓을 때까지 열을가하십시오. 완전히 녹을 때까지 혼합물을 자주 흔든다.

-Czapek 한천 웨지

용해 된 혼합물을 튜브에 분배하고 121 ° C에서 15 분 동안 오토 클레이브합니다. 오토 클레이브에서 제거 할 때 튜브를 놓기 전에 균질화하고 응고되도록합니다.

-Czapek 한천 플레이트

용해 된 혼합물을 121 ° C에서 15 분 동안 오토 클레이브하고 50 ° C로 식히고 균질화하고 멸균 페트리 접시에 20ml를 붓습니다. 사용할 때까지 굳어 뒤집어 냉장고에 보관하십시오.

pH는 7.3 ± 0.2로 유지되어야합니다. 탈수 배지의 색상은 흰색이고 준비된 배지는 옅은 호박색이며 응집 침전물의 존재로 인해 약간 흐릿합니다.

산성 pH에서 Czapek 배지

이미 설명한대로 준비하되 준비된 배지 1 리터당 멸균 10 % 젖산 10ml를 추가합니다. 수정 된 Czapek 배지는 pH 3.5 ± 0.2 여야합니다.

수정 된 Czapek 매체

탈수 배지 45.4g을 달아 물 1 리터에 녹인다. 나머지 준비는 위에서 설명한 것과 동일합니다. 탈수 배지의 색상은 흰색이고 준비된 배지는 흰색입니다. 배지의 최종 pH는 6.8 ± 0.2입니다.

Czapek- 효모 배지

Czapek Yeast Extract Agar (CYA)라고도합니다. 그것은 고전적인 Czapek 한천의 요소와 효모 추출물을 포함합니다.

사용하다

Czapek 배지는 토양, 채소, 곡물, 공기, 곤충 등의 샘플에서 부영 양성 미생물을 찾는 데 사용됩니다.

산성 pH의 Czapek 한천은 호 산성 미생물의 성장에 사용되는 반면 변형 된 Czapek 한천은 칸디다 알비 칸스 복합체 종에서 클라 미도 포자 형성에 특히 유용합니다.

마지막으로, Czapek-yeast agar는 Aspergillus와 Penicillium의 분리에 매우 유용합니다.

뿌리다

-Czapek 한천

토양에서 방선균을 찾으려면 다음과 같이 진행하십시오. 샘플을 페놀 수로 30 분 동안 처리 한 다음 1 mL의 현탁액을 Czapek 한천에 뿌립니다. 28 ° C에서 5 ~ 7 일 동안 배양합니다.

야채, 곡물 및 곤충 샘플의 경우 한천에 직접 놓습니다. 한천 표면에 희석하여 0.1ml를 뿌릴 수도 있습니다.

-수정 된 Czapek 한천

파종을 위해 직선 고리 또는 바늘을 사용하고 면봉으로 함침하고 한천을 접종하여 판 바닥에 닿을 때까지 구멍을 뚫습니다. 28 ° C에서 24 시간 동안 배양하고 클라 미도 포자가 형성되었는지 확인하기 위해 플레이트 위와 아래에서 현미경으로 검사합니다.

배양 온도 및 시간

배양 온도와 시간은 분리 할 미생물의 유형에 따라 다릅니다. 플레이트는 일반적으로 20 ~ 25 ° C의 온도 범위에서 1 ~ 2 주 동안 배양됩니다.

그러나 일부 균주에는 특정 조건이 있습니다. 예를 들어, Aspergillus 속의 대부분의 종은 30 ° C에서 최적으로 자랍니다. 그러나 A. fumigatus는 50 ° C에서 자랍니다.

배양 시간에 관해서는 1 ~ 2 주가 정상이지만, 칸디다 알비 칸 스는 25 ° C에서 24 ~ 48 시간 내에 발달 할 수 있습니다.

이 배지에있는 일부 식민지의 특성

-Penicillium atrovenetum

27 ° C에서 12 일 동안 배양하면 발생합니다. 그들의 식민지는 작습니다 (25mm).

식민지는 벨벳 같은 외관을 가지고 있으며 정의 된 흰색 테두리와 중앙에 청록색 색조가 있으며 나이가 들면서 회색으로 변합니다. 집락의 뒷면은 주황색으로 안료 생산으로 인해 가운데가 같은 색이됩니다.

-Aspergillus niger

그것은 흰색에서 노란색 균사체와 검은 포자로 발달합니다.

-칸디다 알비 칸스

크림색의 밝은 베이지 색 집락이 발생합니다. 변형 된 Czapek 한천에서는 클라 미도 포자를 형성합니다.

-Aspergillus parasiticus

짙은 녹색 균사체는 25 ° C에서 7 일 만에 발생합니다.

QA

배양 배지의 품질을 평가하기 위해 인증 된 대조군 균주 (예 : Aspergillus niger MKTA 16404, Candida albicans MKTA 10231)를 심을 수 있습니다.

Aspergillus niger는 약 5 일 만에 흰색에서 노란색 균사체와 검은 색 포자를 발달시키는 반면, Candida albicans는 25 ° C에서 24 시간 배양하면 만족스러운 성장을 보입니다. 식민지는 크림색입니다.

한계

일부 연구에 따르면 방선균의 회수율이 가장 좋은 한천은 감자 덱 스트로스 한천이고 2 위는 Czapek 한천이지만 Aspergillus 및 Penicillium의 회수를 위해서는 Czapek 한천이 가장 높은 회수율을 제공하는 것으로 밝혀졌습니다.

참고 문헌

1. Dávila M, et al. 농업 적으로 중요한 식물 병원성 진균에 대한 길항 방선균. Mex 목사. 과학. Agríc 2013, 4 (8) : 1187-1196. scielo.org에서 구할 수 있습니다.
2. Luna M, Lozada Y, Wheats Á. 저장된 녹색 커피 (Coffea arabica)에서 오크라 톡신 A를 생성하는 Aspergillus niger 균주 분리. Mex 목사. 마이크. 2010; 32 : 63-68. scielo.org에서 구할 수 있습니다.
3. Wikipedia 기고자. Czapek 매체. Wikipedia, The Free Encyclopedia. 2019 년 1 월 13 일 20:30 UTC. 사용 가능 : en.wikipedia.org
4. Conda Pronadisa Laboratories. 수정 된 Czapek-Dox Agar. 사용 가능 : condalab.com
5. 문화 미디어 마이크로 킷. Czapek-Dox Agar. Diosponible in : Medioscultivo.com