영양 한천 : 이론적 근거, 준비 및 사용 - 생물학 - 2026

영양 한천 비 선택적 매체없이 배양 미분 고체이다. 영양 학적 관점에서 요구하지 않는 모든 종류의 박테리아가이 배지에서 자랍니다.

그것은 단순한 매체이며 이름에도 불구하고 Brain Heart Infusion Agar 또는 Trypticase Soy Agar와 같은 다른 유사한 매체에 비해 영양가가 낮습니다.

영양 한천의 콜로니 수

실험실에서의 유용성은 매우 다양합니다. 주로 종을 계대 배양하고, 균주를 유지하고, 콜로니를 계산하고, 혈액 한천을 준비하기위한 기초로 사용됩니다.

마찬가지로 밝은 베이지 색으로 인해 일부 박테리아 균주에 의해 생성 된 안료의 생성은 예외적으로 구별 될 수 있습니다. 아우 레 우스.

또한 시장에서 가장 저렴하게 성장하는 미디어 중 하나입니다.

기초

이미 위에서 언급했듯이, 이것은 제한없이 그리고 해석 할 복잡한 반응없이 세균 성장을위한 영양소를 제공하는 데 의존하는 매우 간단한 배지입니다.

배지가 반투명하기 때문에 깊이 파종 방법으로 집락을 계수하는 데 이상적입니다.

구성

주로 육류 추출물 또는 효모 추출물, 펩톤 또는 젤라틴 췌장 소화제, 한천, 염화나트륨 및 증류수로 구성됩니다.

육류 또는 효모 추출물과 펩톤은 박테리아가 에너지 및 성장 인자의 원천으로 사용할 탄소 및 미네랄 (질소, 인 및 황)의 필수 공급원을 나타냅니다.

마찬가지로 한천은 모든 고체 배양 배지의 기본이며, 젤라틴을 대체하게되는데, 이는 Robert Koch가 배지에 단단한 일관성을 부여하기 위해 사용한 첫 번째 기본 화합물이었습니다.

한천은 갈락토스, 갈 락토 만난, 아가 로스 및 아가로 펙틴으로 구성된 다당류입니다. 40 ° C로 설정되고 100 ° C에 가깝게 녹습니다.

부분적으로 염화나트륨은 세균 발생에 필요한 삼투압을 배지에 제공합니다.

마지막으로 물은 동결 건조 된 화합물을 수화하고 용해시키는 역할을합니다. 중성 pH로 조정 된 증류수를 사용해야합니다. 수돗물은 매체에서 인산염과 반응하여 불용성 염을 형성 할 수있는 칼슘과 마그네슘이 포함되어 있으므로 사용하지 마십시오.

예비

영양 한천 1 리터의 경우 탈수 배지 31g을 칭량해야합니다. 플라스크에 넣고 1 리터의 증류수에 녹입니다. 5 분 동안 방치 한 후 열원으로 가열하고 1 ~ 2 분 동안 끓을 때까지 계속 혼합합니다.

배양 배지의 준비.

그런 다음 플라스크를 오토 클레이브에 넣고 121 ° C에서 20 분 동안 멸균합니다.

오토 클레이브에서 살균

시간이 끝나면 오토 클레이브에서 제거하고 층류 후드 또는 분젠 버너를 사용하여 멸균 페트리 접시에 담습니다.

페트리 접시가 일회용 (플라스틱) 인 경우 한천의 온도가 약 50 ° C 일 때 배지를 배포하여 과도한 열에 의해 변형되는 것을 방지해야합니다.

뒤집힌 플레이트 홀더에 굳어 보관하고 사용할 때까지 2-8 ° C에서 냉장 보관하십시오.

판은 씨를 뿌리기 전에 템퍼링되어야합니다. 영양 한천 플레이트가 오염되었거나 탈수 된 경우 사용해서는 안됩니다.

준비된 배지의 pH는 7.3 ± 0.2로 조정되어야합니다.

응용

미생물학 실험실에서 사용되는 가장 간단한 배양 배지입니다. 그것의 제형은 요구되지 않는 박테리아의 성장에 탁월합니다.

주요 용도는 다음과 같습니다.

혈액 한천 준비의 기초로

이 배지는 때때로 혈액 한천을 준비하기위한 기본으로 사용되지만 가장 일반적으로 사용되는 기본은 아닙니다.

포자 형성 박테리아의 포자 형성을 자극

이 배양 배지는 특히 Bacillus sp.와 같은 포자 형성 박테리아의 포자 형성을 자극하는 데 유용합니다.

이를 위해 Bacillus 속 균주를 파종하고 호기 성균 증에서 37 ° C에서 24 시간 동안 배양합니다. 콜로니가 성장하면 플레이트에 온도 스트레스가 가해집니다. 즉, 오븐의 온도가 44 ° C로 상승하고 추가로 24 시간 동안 방치되거나 24 시간 동안 냉장고에 보관됩니다.

시간이 끝나면 배양 물을 얼룩지게하고 그람 염색 또는 Shaeffer-Fulton 포자 염색으로 염색합니다. 내생 포자 (바실러스 내부의 포자)와 외생 포자 (바실러스 외부의 포자)가있는 바실리가 관찰됩니다.

스트레인 유지

일부 연구 또는 대학 교육 지원 실험실에서는 연구 작업 또는 교육 실습 준비를 위해 박테리아 은행 (박테리오 테카)을 사용하기 위해 가능한 한 오랫동안 임상 적으로 중요한 생존 박테리아를 유지해야합니다. 학생들은 이러한 미생물을 조작하고 식별하는 방법을 배웁니다.

이 목적을 위해 영양 한천과 뇌 심장 주입 한천을 사용할 수 있습니다. 한천을 준비하고 베이클라이트 뚜껑이 달린 튜브에 부어 바닥에 기울여 한천이 응고되어 바닥에 블록을 형성하고 표면에 베벨을 형성합니다 (플루트 부리).

각 튜브에는 파종 할 박테리아의 이름과 날짜가 표시되어 있습니다. 각각의 박테리아를 경사면에 파종하고 24 시간 동안 배양 한 후 집락이 성장하면 튜브를 실온에서 보관합니다.

bacterioteca는 배지의 오염과 탈수 및 박테리아의 죽음을 방지하기 위해 1 ~ 3 개월 동안 갱신해야합니다.

이 방법으로 까다 롭지 않은 박테리아 만 유지할 수 있습니다.

식민지 수

표준 카운트 한천과 같은 콜로니를 계산하는 특수한 방법이 있지만, 영양 한천은 드리 갈 스키 주걱으로 표면을 파종하거나 깊이로 이러한 목적으로 사용할 수 있습니다. 이러한 이유로 식품과 물의 미생물 학적 분석에 매우 유용합니다.

진단 테스트 실행

혈액이나 다른 첨가물을 포함하지 않는 배지이기 때문에이 배지에서 자란 콜로니를 취하여 카탈라아제 검사를 수행하는 것이 이상적입니다.

마찬가지로 밝은 색으로 인해 시드 한천 영역에서 간섭없이 직접 산화 효소 테스트를 수행하는 것으로 나타납니다.

레크리에이션 소금물 (해변)에서 중온 성 호기 생물의 회수

10 % 해수로 준비된 영양 한천은 해변 물의 중온 성 호기성 평가에 유용합니다.

이러한 방식으로, 이러한 유형의 샘플에서 기존 방식으로 제조 된 배양 배지를 사용할 때 결과가 겹치기 때문에 물이 이러한 미생물로 인한 실제 오염 수준을 인식 할 수 있습니다.

이것은 Cortez et al. 2013 년 연구 작업에 참여했습니다.

이것은 박테리아가 고염 환경에서 저염 환경으로 이동할 때 겪는 갑작스러운 변화로 인해 설명 될 수 있으며, 따라서 미생물은 생존 가능하지만 재배 불가능한 무기력 상태에 들어갑니다.

참고 문헌

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