한천 보겔 - 존슨 특히 포도상 구균의 분리 용으로 제형 고체 배지 선택적 및 차동 배양한다. 이 배지는 1960 년 Vogel과 Johnson이 Zebovitz, Evans 및 Niven에 의해 1955 년에 공식화 한 텔루 라이트 글리신 한천의 변형으로 만들어졌습니다.
변형은 배지에 존재하는 만니톨의 농도를 높이고 pH 지시약을 포함하는 것으로 구성되었습니다. 현재의 공식은 트리 테인, 효모 추출물, 만니톨, 인산이 칼륨, 염화 리튬, 글리신, 페놀 레드, 한천, 1 % 텔루르 산 칼륨 용액 및 물로 구성됩니다.
출처 : Pixinio.com/Laboratorio de la Clínica ProcreaTec. 플리커.
Vogel-Johnson 한천과 같이 짠 만니톨 한천 및 Baird Parker 한천과 같이 S. aureus의 분리에 선택적인 다른 배지가 있다는 점에 유의해야합니다. 이런 의미에서 Vogel-Johnson 한천의 기초는 짠 만니톨 한천과 Baird Parker 한천의 혼합물이라고 할 수 있습니다.
첫 번째로 S. aureus 콜로니는 만니톨을 발효하고 pH 표시기를 노란색으로 바꾸는 방식으로 구별됩니다. 반면에 두 번째로 S. aureus는 텔루 라이트를 텔 루륨으로 환원시키고 회색에서 검은 색 집락을 형성하는 특징이 있습니다. 두 특성 모두 Vogel-Johnson 한천에서 관찰됩니다.
이 배지는 해당 배지와 마찬가지로 식품 샘플, 산업 제품의 위생 관리 및 임상 샘플에서 황색 포도상 구균을 검출하는 데 유용합니다.
기초
영양소 공급
Vogel-Johnson 배지에는 트립 테인과 효모 추출물이 포함되어 있습니다. 두 물질 모두 박테리아 성장에 필요한 탄소 및 질소 공급원 역할을하는 장쇄 아미노산을 제공합니다. 이 배지에서 성장할 수있는 박테리아는 이러한 물질에서 영양분을 섭취합니다.
선택적 힘
Vogel-Johnson 한천은 그람 음성균과 일부 그람 양성균의 성장을 억제 할 수있어 응고 효소 양성 포도상 구균의 발생에 유리합니다. 억제 물질은 텔루르 산 칼륨, 염화 리튬 및 글리신입니다.
차동 전력
이 차등 매체를 만드는 물질은 만니톨과 텔루르 산 칼륨입니다. 만니톨은 탄수화물이며 발효되면 배지가 빨간색에서 노란색으로 변하는 산이 생성되며, 이는 빨간색 페놀 pH 지표의 존재로 인해 발생합니다.
반면, 무색 텔루 라이트는 유리 금속 텔루르로 환원 될 때 짙은 회색에서 검은 색으로 변합니다.
황색 포도상 구균은 만니톨을 발효시키고 텔루 라이트를 텔 루륨으로 감소시킵니다. 이러한 이유로이 배지에서 전형적인 S. aureus 군체는 노란색 배지로 둘러싸인 회색 또는 검은 색입니다.
이 배지에서 성장하고 텔루 라이트 또는 발효 만니톨을 감소시키지 않는 박테리아는 펩톤을 사용하여 배지가 알칼리화되기 때문에 원래 색보다 훨씬 강렬한 붉은 색 배지로 둘러싸인 투명한 콜로니를 형성합니다.
반면, 텔루 라이트를 감소 시키지만 만니톨을 발효하지 않는 박테리아는 진한 빨간색 배지로 둘러싸인 회색 또는 검은 색 집락으로 성장합니다.
텔루르 산 칼륨을 첨가하지 않고 배지를 준비했다면, S. aureus 콜로니는 짠 만니톨 한천 에서처럼 노란색 배지로 둘러싸인 노란색 콜로니로 발전 할 것입니다.
삼투 균형 및 응고제
인산이 칼륨은 배지의 삼투 균형을 유지하고 pH를 중성으로 조정합니다. 7.2. 한천은 배양 배지에 단단한 일관성을 제공합니다.
예비
텔루르 산 칼륨 용액 1 % w / v
이 용액은 오토 클레이브에서 살균 할 수 없기 때문에 탈수 배지에는 포함되지 않습니다. 이러한 이유로 별도로 준비되어 이미 멸균 된 배지에 추가됩니다.
일부 상업용 주택은 즉시 사용 가능한 1 % 텔루르 산 칼륨 용액을 판매합니다. 실험실에서 준비하려면 다음과 같이 진행하십시오.
1.0g의 텔루르 산 칼륨을 달아 증류수 100ml를 측정합니다. 텔루르 산 칼륨을 물의 일부에 녹인 다음 100ml가 될 때까지 물의 양을 완성합니다. 여과 방법으로 용액을 살균하십시오.
Vogel-Johnson Agar Base Medium
60gr의 탈수 배지를 달아 증류수 1 리터에 녹입니다. 혼합물은 완전한 용해를 돕기 위해 끓을 때까지 가열됩니다. 용해 과정에서 배지는 자주 교반됩니다.
15 파운드 압력 및 121 ° C에서 15 분 동안 오토 클레이브에서 멸균하십시오. 오토 클레이브에서 꺼내 배지가 약 45 ~ 50 ° C의 온도에 도달 할 때까지 그대로 둡니다. 이전에 준비한 1 % 텔루르 산 칼륨 용액 20ml를 추가합니다.
멸균 된 페트리 접시에 섞어 붓습니다. 굳고 접시 홀더에 거꾸로 주문하여 나중에 사용할 때까지 냉장고에 보관하십시오.
준비된 배지의 최종 pH는 7.2 ± 0.2 여야합니다.
샘플을 파종하기 전에 플레이트가 실온에 도달 할 때까지 기다리십시오.
준비된 매체의 색상은 빨간색입니다.
사용하다
모든 유형의 샘플에서 S. aureus 분리에 사용할 수 있지만 주로 의약품, 화장품 및 식품의 미생물 학적 분석에 사용됩니다.
접종 물은 밀도가 높은 것이 좋습니다. 파종은 백금 손잡이로 채점하거나 Drigalski 주걱으로 표면으로 채점 할 수 있습니다.
플레이트를 35-37 ° C에서 24 ~ 48 시간 동안 호기 성균 증에서 배양합니다.
QA
다음 제어 균주를 사용하여 Vogel-Johnson 배지에서 품질 관리를 수행 할 수 있습니다.
Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 또는 Proteus mirabilis ATCC 43071.
예상 결과는 다음과 같습니다 : 황색 배지로 둘러싸인 검은 색 집락으로 만족스러운 S. aureus 균주 성장. S. epidermidis의 경우 적색 배지로 둘러싸인 반투명 또는 검은 색 집락이있는 규칙적인 성장.
마찬가지로, E. coli의 경우 전체 억제가 예상되고 Proteus mirabilis의 경우 부분 또는 전체 억제가 예상됩니다. 성장하면 드물게 그렇게 할 것이고 식민지는 붉은 색으로 둘러싸인 검은 색이 될 것입니다.
참고 문헌
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