펩톤 수 : 근거, 준비 및 사용 - 생물학 - 2026

펩톤 물은 주로 음식 샘플 희석제 또는 기타 물질로서 사용하는 비 선택적 액체 농축 매체이다. 화학적 관점에서 볼 때이 매체는 매우 간단하며 고기 펩톤, 염화나트륨 및 물을 포함합니다.

특정 영양가가있어 샘플을 풍부하게 할 수 있습니다. 남용 된 박테리아가있는 경우이 배지는 생존력을 복구 할 수 있습니다. 장내 세균과에 속하는 박테리아의 회복에 특히 유용합니다.

병에 펩톤 물. 출처 : MSc. 마리 엘사 길

살모넬라 균을 회수하는 경우, 뷔페 식 펩톤 물 변형을 사용하는 것이 좋습니다. 이것은 샘플에 대한 사전 농축 배지 역할을하며,이 경우 인산이 나트륨 및 인산이 칼륨과 같은 다른 원소를 포함합니다.

일반적으로 펩톤 수는 중성 pH에서 제조되지만 분리되는 박테리아는 다음과 같이 알칼리성이기 때문에 pH가 8.5 ± 0.2 (알칼리성)가되어야하는 다른 변형이 있습니다. 비브리오 콜레라.

또한이 배지는 탄수화물 발효 테스트를위한 기본 배지로 사용할 수 있습니다.

기초

펩톤은 박테리아 성장에 필요한 영양소, 특히 질소와 단쇄 아미노산을 제공하는 반면 염화나트륨은 삼투 균형을 유지합니다.

또한 산업 공정에 의해 손상된 세균 세포를 분산, 균질화 및 복구 할 수 있습니다.

희석제로서 생리적 용액 (SSF) 또는 인산염 완충 용액 (PBS)을 효과적으로 대체하는 것이 이상적입니다.

탁도를 관찰하면 세균의 성장이 분명합니다.

예비

수제 준비 (상업용 아님)

펩톤 1g과 염화나트륨 8.5g을 달아 증류수 1 리터에 녹인다. pH는 7.0으로 조정해야합니다. 이를 위해 1N 염화나트륨을 사용할 수 있습니다.

상업적 매체를 사용한 준비

탈수 배지 15g을 달아 증류수 1 리터에 녹입니다. 혼합물을 균질화하십시오. 필요한 경우 전체 용해를 돕기 위해 혼합물을 1 분 동안 끓입니다. 필요에 따라 100ml 병 또는 10ml 튜브에 제공합니다. 121 ° C에서 15 분 동안 오토 클레이브합니다.

식히고 사용하거나 냉장고에 보관하십시오. 배지의 최종 pH는 7.2 ± 0.2입니다.

탈수 배지의 색상은 밝은 베이지이고 준비된 배지는 밝은 호박색입니다.

발효 테스트 준비

멸균 전 이전 준비에 탄수화물을 최종 농도 1 %에 추가해야하며 Andrade 지시약 (산성 푹신) 또는 페놀 레드 (0.018g / L)를 첨가해야합니다. 가스 형성을 관찰하기 위해 튜브에 더럼 벨을 장착해야합니다.

펩톤 물의 다른 변형

완충 또는 완충 된 펩톤 수

카제인, 염화나트륨, 인산이 수소 칼륨 및 인산 수소 나트륨 도데 카 하이드레이트의 효소 가수 분해물을 포함합니다. 최종 pH는 7.0 ± 0.2입니다.

준비를 위해 탈수 배지 20g을 달아 증류수 1 리터에 녹입니다. 약 5 분 동안 그대로 두십시오. 완전히 녹을 때까지 1 분간 가열합니다.

필요에 따라 적절한 병에 붓습니다. 오토 클레이브를 사용하여 121 ° C에서 15 분 동안 살균합니다.

-알칼리성 펩톤 수

탈수 배지 25g을 달아 물 1 리터에 녹인다. 위에서 설명한대로 진행하십시오. pH 범위는 8.3에서 8.7입니다.

사용하다

접종은 샘플을 직접 배치하여 수행됩니다.

특히 손상된 박테리아가 의심되는 경우 샘플을 희석하는 데 사용됩니다. 일반적으로 희석은 1:10과 1 : 100입니다.

35-37 ° C에서 호기 생물에서 24 시간 동안 배양합니다.

대변 ​​샘플

살모넬라에 대한 대변 샘플의 경우, 전 농축 배지로 완충 또는 완충 된 물을 사용하는 것이 좋습니다.

이렇게하려면 다음과 같이 진행하십시오.

대변이 형성되면 샘플 1g을 채취하십시오. 액체 인 경우 대변 1ml를 취하여 10ml의 펩톤 물이 담긴 튜브에 현탁합니다. 직장 면봉의 경우, 면봉에 포함 된 물질을 완충 된 펩톤 물로 튜브에 배출합니다.

모든 경우에 샘플을 잘 혼합하고 균질화하십시오.

37 ° C에서 18 ~ 24 시간 동안 배양합니다. 이후 셀레 나이트 시스틴 브로 쓰 또는 테트라 티오 네이트 브로 쓰와 같은 농축 브로 쓰에서 37 ° C에서 18-24 시간 더 계대 배양한다. 마지막으로 SS 한천, XLD 한천, Hektoen 한천과 같은 Salmonella에 대한 선택적 배지에서 재배하십시오.

식품 샘플

펩톤 물은 농축 배지 또는 단순 희석제로 사용되지만 살모넬라 종을 찾는 경우 이미 설명한 바와 같이 사전 농축 배지로 사용됩니다.

음식에서 다음과 같이 진행하십시오.

고체 식품의 경우 샘플의 무게가 25g이고 액체 식품의 경우 25ml가 측정됩니다. 225 ml의 펩톤 물이 들어있는 플라스크에 상기 부분을 놓습니다. 샘플을 혼합하고 균질화합니다.

미생물 부하가 높은 것으로 의심되는 경우, CFU (콜로니 형성 단위)의 계수를 용이하게하기 위해 연속 또는 소수 희석을 수행 할 수 있습니다.

희석 횟수는 샘플 유형과 분석가의 경험에 따라 다릅니다.

반대로 미생물 부하가 매우 낮은 것으로 의심되는 경우 희석을 수행 할 필요가 없습니다. 그 후, 선택적 배지에서 계대 배양합니다.

Vibrio cholerae 또는 기타 Vibrio 종을 찾기 위해 조개류, 어류 등 바다에서 잡은 식품의 경우 pH 8.5로 조정 된 펩톤 수 (알칼리성 펩톤 수)를 사용해야합니다.

QA

준비된 각 배치에서 1 ~ 2 개의 튜브를 접종하지 않고 37 ° C의 에어로 바이오 시스에서 24 시간 동안 배양해야합니다. 시간이 끝나면 탁도 또는 색상 변화가 관찰되지 않아야합니다.

알려진 대조군 균주를 사용하여 효과를 평가할 수도 있습니다.

이를 위해 대장균 ATCC 25922, 대장균 ATCC 8927, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 1428, Salmonella enteritidis ATCC 13076과 같은 박테리아 균주를 사용할 수 있습니다.

모든 경우에 만족스러운 미생물 발생이 예상되며 이는 배지의 탁도에 의해 관찰됩니다.

한계

-탈수 된 매체는 흡습성이 매우 높으므로 습기가없는 곳에 보관해야합니다.

-어떤 종류의 열화가 관찰되면 매체를 사용하지 마십시오.

-탈수 된 배양 배지는 10 ~ 35 ° C 사이에 보관해야합니다.

-준비된 배지는 냉장 보관해야합니다 (2-8 ° C).

참고 문헌

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