lactophenol 블루 또는 파란색면은 단일 염료의 특성과 준비가되어 있습니다. 임상 실험실에서 주로 균사, 배아 관 및 포자와 같은 곰팡이 구조를 착색하는 데 사용됩니다.
특정 진균의 추정 또는 예비 진단에 도움이되지만 생화학 또는 혈청 검사와 같은보다 구체적인 검사로 진단을 강화하는 것이 항상 권장됩니다.
락토 페놀 블루 염색의 그래픽 표현, 락토 페놀 블루로 염색 된 얼룩, 현미경 장착 제제. 출처 : 공개 도메인 Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8
락토 페놀 블루는 젖산, 아닐린 블루, 글리세린, 페놀 및 탈 이온수로 구성됩니다. 실험실에서 준비하거나 바로 사용할 수 있습니다. 일단 준비되면 사용할 준비가 된 것입니다. 어떤 경우에도 희석해서는 안됩니다.이 조치는 끔찍한 결과를 가져 오기 때문입니다.
성분의 농도는 페놀이 박테리아 미생물을 제거하는 반면 젖산은 곰팡이 구조 주변에 보호막을 생성하기 때문에 곰팡이 구조를 염색하는 데 이상적입니다. 마지막으로 아닐린 블루는 곰팡이의 구조에 부착하는 친화력이 있습니다.
기초
락토 페놀 블루를 사용하면 특정 균류 배양의 곰팡이 구조에 대한 간단한 염색이 수행됩니다. 하나의 착색제만을 사용하기 때문에 단순합니다.
락토 페놀 블루는 염색과는 별도로 젖산과 페놀의 결합 작용으로 시료의 청징 제 역할을하며, 페놀은 매염제 역할을하며 동시에 가수 분해 효소를 억제하여 미생물의 용해를 방지합니다. 있을 수 있습니다.
젖산은 곰팡이 구조의 형태를 보존합니다.
반면 아닐린 블루는 키틴 함유 구조에 접착 또는 결합하는 특성을 가지고 있습니다. 구조는 하늘색으로 물들어 있습니다.
곰팡이 미생물, 특히 곰팡이의 세포벽에는 키틴이 포함되어 있으므로이 염료가 이러한 미생물을 염색하는 데 이상적입니다.
형질
락토 페놀 블루 용액은 강산성이며 약간 탁한 수성 염료이며 밝은 파란색입니다. 15 ° C에서 25 ° C 사이에 보관하면 안정적입니다. 병은 제대로 닫혀 있어야합니다. 피부와 점막을 자극하고 부식시킵니다.
구성
락토 페놀 블루 1 리터를 제조하는 공식은 다음과 같습니다.
-250g / L 젖산
-1.0 g / L 아닐린 블루 또는 메틸 블루
글리세린 -500g / L
-250g / L 페놀
탈 이온수 또는 증류수 -250ml.
페놀은 미리 데워진 물에 용해됩니다. 젖산과 글리세린을 첨가하고 잘 섞습니다. 마지막으로 아닐린 블루가 용해됩니다. 다시 혼합되어 사용할 준비가되었습니다.
80ml의 락토 페놀 블루 용액을 준비하는 부분은 다음과 같습니다.
-20g 페놀 결정
젖산 -20ml
글리세린 또는 글리세롤 -40ml
-20 ml 증류수.
사용하다
곰팡이 구조를 염색하고 현미경 수준에서 관찰 된 형태 학적 특성을 통해 곰팡이의 추정 진단을 내릴 수 있습니다.
방법
문화의 곰팡이 구조 염색
-구조를 관찰해야하는 곰팡이의 순수 배양을 취하십시오.
-대부분의 곰팡이는 환경에 쉽게 퍼져 위험을 나타 내기 때문에 생물 보안 표준을 준수해야하므로 마스크와 장갑을 사용하여 층류 후드 또는 라이터 아래에서 작업하는 것이 좋습니다. 운영자를 위해.
-락토 페놀 블루 한 방울을 슬라이드에 놓습니다.
-양질의 접착 테이프의 작은 정사각형을 자르고 이미 멸균되고 차가운 백금 손잡이 끝에 매우 조심스럽게 부착합니다.
-백금 손잡이는 곰팡이 군집의 가장 표면적 인 부분에 접근하고 배양 물은 접착 테이프가있는 정확한 위치에 매우 조심스럽게 만져집니다.
-그런 다음 슬라이드로 가져 와서 락토 페놀 블루 방울 위에 바로 놓아서 테이프가 완벽하게 확장되고 염료로 윤활 처리되었는지 확인합니다. 백금 손잡이는 매우 정교하게 제거됩니다.
-락토 페놀 블루 한 방울을 테이프 위에 놓고 커버 슬립을 위에 놓습니다. 곰팡이는 매우 약하므로 곰팡이의 구조를 파괴하지 않도록 너무 많은 압력을 가하지 마십시오. 착색제는 약 3 ~ 4 분 동안 작용하도록해야합니다.
-이 시간이 지나면 조제 물을 10 배 또는 40 배 배율로 현미경으로 관찰 할 수 있습니다. 100X 관찰이 필요한 경우 침지 오일을 사용해야합니다.
-곰팡이의 구조는 일반적으로이 유형의 곰팡이의 특징적인 갈색을 유지하는 탈피 성 곰팡이를 제외하고는 파란색으로 염색됩니다.
직접 생물학적 표본 염색
객담, 고름, 삼출물, 분비물 등과 같은 직접적인 생물학적 샘플을 연구해야하는 경우 샘플 오염 제거를위한 사전 절차가 필요합니다. 이를 위해 NaOH 용액이 사용됩니다.
모발 샘플의 경우 직접 염색 할 수 있습니다.
여러 개의 영향을받은 모발 (총 10 개)을 추정 백선 모 막염 병변 (탈모증 부위)에서 가져와 슬라이드 (슬라이드 당 3-4 개 모발)에 놓습니다. 락토 페놀 블루 몇 방울을 위에 놓고 즉시 커버 슬립으로 덮습니다.
집게로 슬라이드를 잡고 버너 위에 부드럽게 가열합니다. 이렇게하려면 화염을 3-4 회 빠르게 통과해야합니다. 40X에서 현미경을 관찰하고 모발 외부 또는 내부의 포자를 찾습니다 (각각 ectothrix 또는 endothrix). 필요한 경우 침지 오일을 추가하고 100X에서 관찰하십시오.
식별에서 세균 튜브 염색
인간 혈청에서 Candida albicans의 추정 배양 물을 37 ° C에서 2 ~ 4 시간 동안 배양 한 후 용액의 일부를 취해 락토 페놀 블루로 염색합니다. 준비는 40X에서 현미경으로 관찰됩니다. 배아 관이 존재하고 포자는 밝은 파란색으로 물 듭니다.
Lactophenol 안전 데이터 시트
NFPA (National Fire Protection Association)는 다양한 측면에 따라 위험을 나타내는 화학 물질에 대한 안전 데이터 시트를 설정합니다. 이들은 색이있는 마름모와 0 ~ 0 범위의 숫자로 표시됩니다. 네.
건강 위험은 파란색으로, 가연성은 빨간색으로, 불안정성 또는 반응성은 노란색으로, 특수 위험은 흰색으로 표시됩니다.
건강
NFPA에 따라 락토 페놀 블루에 의해 제기되는 건강 위험은 레벨 3입니다. 이는 물질을 섭취하거나 피부 또는 점막과 직접 접촉 할 때 매우 위험하다는 것을 의미합니다.
부식성이 높고 자극적 인 물질입니다.
피부 및 점막과 접촉하면 심한 화상을 입습니다.
섭취하면 두통, 혼돈, 무기력, 의식 불명, 호흡 정지 및 심지어 사망을 유발할 수 있습니다.
연소성
NFPA에 따르면 Lactophenol Blue는 인화성에 대해 레벨 1 등급입니다. 이것은 94 ° C 이상으로 가열되는 경우에만 타는 것을 의미합니다.
불안정
반응성 측면에서 NFPA에 따라 레벨 0 (제로)에 나열됩니다. 이것은 반응성의 위험이 없다는 것을 의미합니다. 즉 화학적으로 안정한 물질입니다.
특수 위험
추가 특수 위험을 제공하지 않습니다.
참고 문헌
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