셀렌은 선택적 액체 배지이다. 그것은 살모넬라 속의 장 병원성 박테리아의 존재가 의심되는 샘플의 농축을 위해 Leifson에 의해 설계되었습니다.
이 배지는 미국 공중 보건 협회 (APHA)의 요구 사항을 준수하므로 배설물, 소변, 액체 또는 고체 식품, 물 등의 샘플에서 살모넬라 균의 존재 여부를 조사하는 데 사용됩니다.
셀레 나이트 국물. 출처 : 저자 MSc가 찍은 사진. 마리 엘사 길
그것의 화학적 구성은 이러한 미생물의 회복에 유리하고 차례로 다른 미생물의 성장을 억제합니다. 장내 세균과에 속하는 대부분의 박테리아에 주로 독성이 있습니다. 그러나 그것은 또한 Shigella 균주의 회복을 허용하고 Pseudomonas 및 Proteus의 성장을 억제하지 않습니다.
무수 셀레 나이트 수소 나트륨, 무수 인산 나트륨, 펩톤 및 유당으로 구성됩니다. 시스틴이 첨가 된 변종도 있으므로 그 이름은 셀레 나이트-시스틴 국물입니다.
현재, 셀레 나이트-시스틴 브로 쓰의 사용이 선호되는데, 이는 나트륨 테트라 티오 네이트 브로 쓰와 같은 동일한 목적을위한 다른 선택 배지에서 관찰 된 것과 동등한 더 높은 비율의 살모넬라 회수율이 얻어지기 때문이다.
기초
국물에 함유 된 펩톤은 미생물의 적절한 발달을위한 영양소 역할을합니다. 살모넬라 균주는 펩톤을 질소, 비타민 및 아미노산 공급원으로 사용합니다.
유당은 발효 가능한 탄수화물이고, 나트륨 셀레 나이트는 그람 양성균과 장내 세균, 특히 장내 세균과의 세균에 존재하는 대부분의 세균의 성장을 막는 억제 물질입니다. 인산 나트륨은 배지의 pH를 안정화시키는 완충액입니다.
L- 시스틴을 포함하는 셀레 나이트 브로스 변형의 경우,이 추가 화합물은 셀레 나이트의 독성을 최소화하여 살모넬라의 회수를 증가시키는 환원제입니다.
예비
-셀레 나이트 국물
혼합물의 구성 요소가 있으면 다음을 계량 할 수 있습니다.
무수 나트륨 수소 셀레 나이트 4g.
무수 인산 나트륨 10g.
5g의 펩톤.
유당 4g.
1 리터의 멸균 증류수에 화합물을 녹입니다. 완전히 녹이기 위해 약간 가열 할 수 있습니다.
일부 실험실에서는 배지를 고압 증기 멸균 처리해서는 안되므로 유창한 증기에 10 분 동안 노출시켜 멸균합니다. 멸균 된 배지는 사용할 때까지 냉장고에 보관할 수 있습니다.
또한 비 멸균으로 준비 할 수 있으며 멸균 테스트 튜브에 직접 10 ~ 15ml를 제공 할 수 있습니다.
이 경우 즉시 휴식을 취하고 사용하십시오. 배지가 멸균되지 않았으므로 나중에 사용하기 위해 냉장고에 보관할 수 없습니다.
- 상업 환경 준비
상업용 배지가있는 경우 탈수 배지 23g의 무게를 달고 멸균 증류수 1 리터에 녹입니다. 용해를 완료하기 위해 잠깐 가열합니다. 오토 클레이브하지 마십시오. 무균 테스트 튜브에 10 또는 15ml를 무균으로 제공합니다.
배지의 최종 pH는 7.0 ± 0.2 여야합니다.
탈수 된 배지의 색상은 베이지 색이고 조제 물은 가볍고 반투명 한 호박색입니다.
셀레 나이트-시스틴 국물 변종
셀레 나이트 국물과 같은 화합물을 함유하고 있지만 시스틴 10mg을 첨가합니다. 나머지 절차는 위에서 설명한 것과 동일합니다.
응용
이 배지는 질병이 급성기, 무증상 환자 또는 건강한 보균자가 아닌 경우 역학 연구에 사용하기에 특별합니다.
살모넬라 속의 분리는 일반적으로 오염도가 낮은 시료이기 때문에 일반적으로 어렵습니다. 소량이기 때문에 더 많이 발견되는 다른 박테리아 속의 성장과 쉽게 겹칩니다.
반면에 가공 식품을 만드는 원료는 열, 탈수 과정, 소독제 사용, 방사선 및 방부제 등에 노출되는 경우가 많습니다.
따라서 원료에 존재하는 살모넬라 균은 제품에 앞서 언급 한 산업 공정을 거치게하여 잘못 처리됩니다. 마찬가지로, 대변과 같은 임상 검체의 경우에도 항생제 치료를받은 환자에게서 온 경우 균주가 약할 수 있습니다.
따라서 살모넬라 균의 존재가 의심되는 모든 샘플은 유당 브로 쓰에 미리 농축 된 다음 SS 한천, 자일 로스 한천, 라이신 데 옥시 콜레이트 (XLD ), 장용 Hektoen 한천 (HE) 및 밝은 녹색 한천 등이 있습니다.
뿌리다
대변 검체의 경우 검체 1g을 취하고 셀레 나이트 국물 10 ~ 15ml가 담긴 튜브에 현탁합니다. 대변이 액체 인 경우 1ml를 취하고 국물에 현탁합니다. 직장 면봉의 경우 면봉 재료를 국물에 배출합니다.
고체 식품 샘플에서 1 gr을 취하고 셀레 나이트 국물에 현탁하십시오.
액체 식품에서는 두 배의 농도로 셀레 나이트 국물과 동일한 부분으로 혼합됩니다.
소변 샘플의 경우 원심 분리하고 상층 액을 버리고 모든 침전물을 취하여 셀레 나이트 국물에 현탁합니다.
육즙은 37 ° C에서 24 시간 동안 배양한다. 세균 성장은 탁도에 의해 입증됩니다. 42 ° C에서 배양하기 위해 샘플 당 추가 튜브를 포함 할 수도 있습니다. 그 후, 셀레 나이트 국물에서 선택적 고체 배지를 시드합니다.
QA
무균을 제어하기 위해, 접종되지 않은 각 배치의 셀레 나이트 브로 쓰를 37 ° C에서 24 시간 동안 배양합니다. 매체의 혼탁이나 변색이 없을 것으로 예상됩니다.
알려진 균주를 사용하여 다음과 같은 배지의 적절한 기능을 제어 할 수 있습니다.
Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 및 Proteus mirabilis ATCC 43071.
예상되는 결과는 다음과 같습니다.
- 처음 세 가지 박테리아 균주의 경우 성장이 만족 스러워야합니다.
- 대장균 부분 억제를 위해.
- Proteus 적당한 성장을 위해.
한계
셀레 나이트 배지는 사람의 피부에 독성이 있으므로 직접 접촉을 피해야합니다.
참고 문헌
- Flores-Abuxapqui J, Puc-Franco M, Heredia-Navarrete M, Vivas-Rosel M, Franco-Monsreal J. 셀레 나이트 나트륨과 테트라 티오 네이트 나트륨의 배양 배지 간의 비교, 둘 다 37 ° C 및 42 ° C에서 배양 보균자의 대변에서 살모넬라 종의 분리. Rev Biomed 2003; 14 (4) : 215-220
- 브리타니아 연구소. 셀레 니토 국물. 2015. 사용 가능 : britanialab.com
- Neogen Laboratories. 셀레 나이트 국물. 이용 가능 : foodsafety.neogen.com
- González -Pedraza J, Pereira -Sanandres N, Soto -Varela Z, Hernández -Aguirre E, Villarreal- Camacho J. 살모넬라 종의 미생물 학적 분리. 검출을위한 분자 도구. Health, Barranquilla 2014; 30 (1) : 73-94. http://www.scielo.org에서 구할 수 있습니다.
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott 미생물 진단. 12 ed. 에디토리얼 Panamericana SA Argentina.