소이 브로스 트립는 비 선택적 액체 배지, 영양가가 높은 것이다. 다재다능 함으로 인해 미생물학 실험실에서 가장 널리 사용되는 액체 배양 배지 중 하나입니다.
트립 틱 콩 국물 또는 소화 된 카제인 콩의 이름으로도 알려져 있으며, 그 약어는 영어로 된 약어 인 TSB 또는 스페인어로 된 두문자어 인 CST입니다. 그 용도는 그 구성으로 인해 매우 다양합니다. 그것은 트립 테인, 대두 펩톤, 염화나트륨, 인산이 칼륨 및 포도당으로 구성됩니다.
색소 생성이 관찰되는 녹농균 ATCC 27853 균주로 시드 된 트립 티카 제인 대두 국물. 출처 : 저자 MSc가 찍은 사진. Marielsa Gil.
영양이 필요한 세균과 혐기성 세균을 포함하여 임상 적으로 중요한 병원성 세균을 번식 할 수 있습니다. 일부 기회주의적이고 오염 된 곰팡이도이 환경에서 발생할 수 있습니다.
높은 영양 력으로 인해 미생물 오염 감지에 대한 민감도가 높기 때문에 USDA 동물 및 식물 건강 검사 서비스에서 백신의 미생물 분석을 위해 선택되었습니다.
마찬가지로 트립 티카 제인 대두 국물은 화장품 및 식품과 같은 산업 수준의 제품에 대한 미생물 학적 연구를위한 다양한 약전 (유럽 EP, 일본 JP 및 북미 USP)의 요구 사항을 충족합니다.
다른 한편으로,이 매체는 큰 유용성에도 불구하고 상대적으로 저렴하여 대부분의 미생물학 실험실에 적합하다는 점을 언급 할 가치가 있습니다. 준비하는 것도 매우 쉽습니다.
기초
Triptein, peptone 및 포도당은 빠른 미생물 성장을위한 이상적인 배지로 만드는 필수 영양 속성을 제공합니다.
약 6 ~ 8 시간 동안 배양하면 대부분의 미생물에서 이미 성장을 볼 수 있습니다. 그러나 성장하는 데 며칠이 걸릴 수있는 느리게 성장하는 균주가 있습니다.
염화나트륨과 인산이 칼륨은 각각 삼투압 균형과 pH 조절 제로 작용합니다. 성장의 존재는 배지에 탁도가 나타나는 것으로 입증됩니다. 성장이 없으면 배지는 반투명으로 유지됩니다.
밝은 색상으로 인해 기사의 시작 부분에있는 이미지에 표시된 것과 같은 안료 생성을 관찰 할 수 있으며, 이는 녹농균이 생성 한 안료에 해당합니다.
예비
-Triptysein 콩 국물
트립신 콩 국물을 준비하려면 탈수 된 상업용 배지 30g을 디지털 저울로 칭량해야합니다. 그런 다음 플라스크에 담긴 증류수 1 리터에 녹입니다.
혼합물을 5 분 동안 그대로 둔 다음 열원으로 가져가 매체 용해를 돕습니다. 1 분 동안 끓이면서 자주 저어 줘야합니다.
일단 용해되면 필요에 따라 적절한 크기의 튜브로 배포됩니다. 면 플러그 또는 베이클라이트 캡이있는 튜브를 사용할 수 있습니다. 그 후, 튜브는 15 분 동안 121 ° C에서 오토 클레이브의 배지로 멸균됩니다.
배지의 pH는 7.3 ± 0.2로 유지되어야합니다.
탈수 된 배양 배지의 색상은 밝은 베이지 색이며 건조한 장소에서 10 ~ 35 ° C 사이에 보관해야합니다. 준비된 국물은 밝은 호박색이며 냉장고 (2 ~ 8 ° C)에 보관해야합니다.
-트립 티카 제인 콩 국물의 변종
변형 된 트립 티카 제인 대두 국물은 담즙 염과 노보 바이오 신을 첨가하여 대장균 분리에 선택적으로 만들 수 있습니다. 동일한 목적을위한 또 다른 옵션은 반코마이신, 세 픽심 및 텔루 라이트 (2.5 µg / ml)가 보충 된 트립 티카 제 콩 국물을 준비하는 것입니다.
반면에, 더 많은 포도당 (0.25 %)이 생물막의 형성을 자극하는 것이 목적 일 때 트립신 대두 국물에 첨가 될 수 있습니다.
사용하다
혈액이나 혈청을 보충 할 필요없이 Streptococcus pneumoniae, Streptococcus sp 및 Brucella sp와 같은 까다 롭거나 까다로운 박테리아의 성장을 허용 할만큼 영양가가 높습니다.
마찬가지로 Candida albicans Complex, Aspergillus sp 및 Histoplasma capsulatum과 같은 일부 곰팡이가이 국물에서 발생할 수 있습니다.
또한, 혐기성 조건에서이 배지는 Clostridium 속에 속하는 박테리아뿐만 아니라 임상 적으로 중요한 비포 자 혐기성 박테리아를 회수하는 데 이상적입니다.
6.5 % 염화나트륨을 첨가하면 Enterococcus 및 기타 Group D Streptococcus의 성장에 사용할 수 있습니다.
연구 수준에서는 다양한 프로토콜, 특히 생물막 또는 생물막 형성 박테리아 연구에서 매우 유용했습니다. 또한 Kirby and Bauer 방법으로 항생제를 수행하는 데 필요한 0.5 % Mac Farland 박테리아 현탁액을 준비하는 데 사용됩니다.
이 경우 비슷한 모양의 3 ~ 5 개의 콜로니를 취하여 4 ~ 5ml의 트립 티카 제인 대두 국물에 유화시킨다. 그런 다음 35 ~ 37 ° C에서 2 ~ 6 시간 동안 배양 한 다음 멸균 식염수를 사용하여 원하는 농도로 조정합니다. 트립 티카 제인 대두 국물은 배양 18 ~ 24 시간 동안 사용해서는 안됩니다.
뿌리다
샘플을 직접 파종하거나 선택적 배지에서 가져온 순수한 콜로니를 계대 배양 할 수 있습니다. 접종 전에 배지가 흐려지지 않도록 접종 물은 작아야합니다.
일반적으로 37 ° C에서 24 시간 동안 호기 균에서 배양되지만 이러한 조건은 찾는 미생물에 따라 다를 수 있습니다. 필요한 경우 37 ° C에서 며칠 동안 혐기성 조건에서 배양 할 수도 있습니다. 예를 들어 빠르게 성장하거나 까다로운 미생물은 최대 7 일 동안 배양 할 수 있습니다.
백신과 같은 제약 물질의 미생물 학적 분석에서 프로토콜은 더 엄격합니다. 이 경우 성장하지 않은 육수는 14 일 동안 계속 배양 될 때까지 폐기되지 않습니다.
QA
준비된 각 배치에서 1 개 또는 2 개의 비 접종 튜브를 배양하여 무균 성을 입증해야합니다. 변경되지 않아야합니다.
알려진 균주를 심어 행동을 평가할 수도 있습니다. 사용할 수있는 균주는 다음과 같습니다.
Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 또는 25923, Escherichia coli ATCC 8739, Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC28omonas 90528omonase ATCC28CC305, 폐렴 구균 ATCC305.
모든 경우에 각 미생물에 대한 적절한 대기 및 온도 조건에서 성장이 만족 스러워야합니다.
한계
-포도당의 발효는 산의 생성으로 인해 배지의 pH를 감소시킵니다. 이것은 산도에 민감한 일부 미생물의 생존에 불리 할 수 있습니다.
-산도 외에도 박테리아가 며칠 후 영양소를 고갈시켜 환경을 열악하게 만드는 독성 물질의 축적으로 인해 균주 유지에 권장되지 않습니다.
-국물은 쉽게 오염되기 때문에 모든 멸균 프로토콜을 관리해야합니다.
-트립 티카 제인 콩 국물을 준비한 후에는 국물을 다른 멸균 튜브로 옮기려고하지 마십시오. 이러한 유형의 조작은 오염에 매우 취약하기 때문입니다.
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