사 프라 닌 : 특성, 용도, 기술, 독성 - 화학 - 2025

safranin는 두 개의 벤젠 노이드 고리 및 2- 퀴 노이드 고리 갖는 화학적 구조라는 meriquinoide 염료이다 후자 붉은 색상을 제공하는 그 되있다.

학명은 3,7-diamino-2,8-dimethyl-5-phenyl-phenaziniumchloro dimethyl safranin이고 화학식은 C ₂₀ H ₁₉ N ₄ 이기 때문에 dimethyl safranin 또는 basic red 2라고도합니다. Cl.

벤젠과 퀴 노이드 고리를 나타내는 safranin의 화학 구조 / safranin의 수용액. 출처 : NEUROtiker 편집 MSc. 마리 엘사 길 / LHcheM

trimethyl-safranin이라는 변종이 있지만 두 물질 사이에는 큰 차이가 없습니다.

Safranin은 단색 염료이며 화학식의 특성에 따라 양전하를 띤 물질입니다. 따라서 음전하 구조에 대한 친화력이 있습니다. 이 구조는 빨간색으로 물들어 있습니다.

이 속성은 진핵 생물과 원핵 생물 모두의 다양한 세포 구조를 염색하는 많은 조직 학적 기술에 적용 가능합니다.

Safranin은 세균학에서 일상적으로 사용하기위한 중요하고 잘 알려진 기술에서 대조 염료로 사용됩니다. 이러한 기술은 그람-허커 염색, 포자 용 Schaeffer Fulton 염색 또는 박테리아 캡슐 염색 등입니다.

형질

사프란 (Crocus sativus 꽃의 낙인에서 얻은 향신료)의 색은이 염료의 이름을 지정하는 영감이었습니다. 사프란이라는 용어에서 사프란이라는 이름이 나옵니다. 이것은 사프란의 색과이 염료가 제공하는 색소 사이의 큰 유사성 때문입니다.

Safranin은 결정 또는 분말로 제공되며 두 가지 모두 물에 용해됩니다. 사 프라 닌 염료는 무취입니다. 얼룩 구조는 빨간색입니다. 사 프라 닌 염료를 끌어들이는 구조를 사 프라 노필이라고합니다.

구조적으로 safranin은 복잡하며 끝에 두 개의 벤제 노이드 고리가 있으며 중앙에는 N ⁺ 양이온이 발견되는 두 개의 퀴 노이드 고리가 있습니다 . 구조의 중심은 색상을 제공하는 시스템입니다. 이러한 특성으로 인해이 착색제는 카테고리 II로 분류됩니다.

사용하다

Safranin은 다양한 구조를 염색하는 데 사용됩니다. 특히 위장관에 존재하는 쿨치 츠키 세포 (엔테로 크로마 핀 세포라고도 함)를 강조합니다.

Rickettsiaceae 계통에 속하는 미생물을 염색 할 수 있습니다. 마찬가지로 Brucella 속의 박테리아를 염색하는 데 사용되는 수정 된 Koster 방법과 같은 다양한 기술에 사용됩니다.

반면에 safranin은 Schaeffer Fulton 포자 염색 기법과 Gram-Hucker 염색에 사용됩니다. 두 기술 모두에서 safranin은 대조 염료로 작동합니다.

첫 번째에서 포자는 말라카이트 녹색을 띠고 나머지 구조는 사 프라 닌에 의해 빨간색입니다. 두 번째로 그람 음성균은 변색 단계에서 보라색 결정의 색을 잃기 때문에 사 프라 닌이 그람 음성균을 붉게 물들이는 것입니다.

또한, safranin은 safranin 1 : 5000의 희석으로 Brucella 한천 배지를 준비하기 위해 세균학에서 사용됩니다. 이 배지는 Brucella suis 종을 나머지 종과 구별하는 역할을합니다. Brucella melitensis와 Brucella abortus는이 배지에서 성장하지만 B. suis는 억제됩니다.

농업 산업 분야에서 사 프라 닌은 2.25 %로 사용되었으며 사탕 수수 식물의 줄기 샘플을 염색하기 위해 1:10으로 희석되었습니다.

이 식물은 일반적으로 박테리아 Leifsonia xyli subsp에 의해 영향을받습니다. xyli는 식물의 목부를 손상시킵니다. 염색 된 줄기는 목부 혈관의 기능을 결정하기 위해 평가됩니다.

세균학 분야의 기술

R 염색을위한 Castañeda 염색

혈액 또는 조직 도말을 완충액 (인산 완충액 pH 7.6)에 넣습니다. 자연 건조 후 메틸렌 블루로 3 분 동안 덮고 사 프라 닌으로 반 염색합니다. Rickettsiae는 빨간색 배경과 대조되는 파란색으로 표시됩니다.

Koster 얼룩 수정

고정을 위해 라이터에 얼룩이 만들어지고 불이 붙습니다. 이어서, 포화 수성 사 프라 닌 2 부와 1mol / L KOH 용액 3 부의 혼합물로 1 분간 덮는다. 증류수로 세척하고 1 % 카 볼릭 메틸렌 블루로 반 염색합니다.

샘플에 Brucella 속 박테리아가 포함되어 있으면 파란색 배경에 주황색으로 나타납니다.

박테리아 캡슐 염색

박테리아 현탁액의 혼합물은 인도 잉크로 만들어지고 safranin이 첨가됩니다. 현미경 아래에서 검은 색 배경의 각 박테리아 캡슐 주위에 붉은 후광이 나타납니다.

포자 염색

박테리아 현탁액으로 확산이 이루어집니다. 그런 다음 열에 고정됩니다. 5 % 말라카이트 그린으로 덮여 있으며 증기가 방출 될 때까지 자주 타 오릅니다. 이 과정은 6-10 분 동안 반복됩니다. 마지막으로 물로 세척하고 0.5 % 사 프라 닌으로 30 초 동안 반 염색합니다. 간균은 붉은 색으로, 포자는 녹색으로 변합니다.

그람-허커 얼룩

박테리아 현탁액으로 얼룩이 만들어지고 열에 고정됩니다. 슬라이드를 크리스탈 바이올렛으로 1 분 동안 덮습니다. 그런 다음 lugol을 매염제 용액으로 1 분 동안 놓습니다. 그 후, 아세톤 알코올로 표백하고 마지막으로 30 초 동안 사 프라 닌으로 반 염색합니다.

그람 양성 박테리아는 청자색과 그람 음성 박테리아를 빨간색으로 염색합니다.

일부 실험실에서는 수정 된 그람-코펠 로프 기술을 채택하기 위해 그람-허커 기술 사용을 중단했습니다. 후자에서는 safranin이 기본 fuchsin으로 대체됩니다. 이것은 safranin이 Legionella, Campylobacter 및 Brucella 속의 종을 약하게 염색하기 때문입니다.

조직학 분야의 기술

Kulchitsky 세포 염색 (엔테로 크로마 핀)

위장관의 조직 절편은 염화은으로 염색됩니다. 그런 다음 티오 황산 나트륨으로 탈색하고 마지막으로 사 프라 닌으로 대조 염색합니다.

Kulchitsky 세포는 흑갈색 과립의 존재로 구별됩니다.

골관절염 얼룩

사 프라 닌은 양전하를 띠기 때문에 글리코 사 미노 글리 칸의 카복실 및 설페이트 그룹에 매우 잘 결합합니다. 이들은 관절 연골을 구성하는 프로테오글리칸의 일부입니다. 이런 의미에서 safranin O로 염색하면 연골 손실 유무를 확인할 수있다.

연골 조직의 손실은 Mankin 척도 또는 골관절염 척도를 사용하여 측정 할 수 있습니다.

기술은 아래에 설명되어 있습니다. 조직학 섹션을 Weigert의 철 헤 마톡 실린 용액이 담긴 트레이에 담근 다음 산성 알코올을 통과시키고 물로 세척합니다.

빠른 녹색으로 슬라이드를 침지하여 착색 과정을 계속하고 아세트산으로 세척 한 다음 이제는 safranin O에 침지합니다. 과정을 완료하기 위해 오름차순으로 다른 농도의 알코올을 사용하여 탈수합니다. 마지막 단계에서는 샘플을 명확히하기 위해 자일 렌 또는 자일 렌이 필요합니다.

슬라이드는 현미경으로 관찰 할 수 있도록 캐나다 발삼 (Canada balsam) 또는 이와 유사한 조건을 갖추고 있습니다.

이 기술을 사용하면 핵은 검은 색으로, 뼈는 녹색으로, 프로테오글리칸이 붉게 발견되는 연골은 염색됩니다.

거대 조류 식별을위한 얼룩

2003 년 Pérez 등은 거대 조류를 염색하는 간단하고 저렴한 기술을 제안했습니다. 샘플은 파라핀 조직학 섹션에서 준비됩니다. 섹션은 1 % 글리세린으로 고정되어 완전히 건조됩니다. 그런 다음 파라핀을 제거하기 위해 자일 롤에 넣습니다.

섹션은 각기 다른 농도 (내림차순)의 에탄올을 포함하는 일련의 트레이를 통과하여 각각 2 분 동안 재수 화됩니다.

이어서, 50 % 에탄올로 제조 된 1 % 사 프라 닌과 1 % 톨루이딘 블루의 3 : 1 혼합물로 5 분 동안 염색된다. 3 방울의 picric acid가 혼합물에 첨가되어 매염제로 작용합니다.

그런 다음 알코올 트레이를 다시 통과하여 탈수되지만 이번에는 오름차순입니다. 마지막으로 자일 롤로 헹구고 샘플을 캐나다 발삼으로 준비하여 관찰합니다.

독성

다행히 safranin은 그것을 취급하는 사람들에게 위험을 나타내지 않는 염료입니다. 무해한 착색제이며 발암 성이 없으며 인화성이 없습니다.

피부 나 점막에 직접 접촉하면 심각한 합병증없이 해당 부위에 약간의 발적을 일으킬 수 있습니다. 이를 위해 다량의 물로 감염된 부위를 씻는 것이 좋습니다.

참고 문헌

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