염색 캡슐은 캡슐이라고 특정 박테리아와 효모 주변 응력 다당류의 구조의 특성을 갖는 차동 염색 기술이다. 캡슐화 된 미생물로 인한 특정 병리를 진단하기 위해 임상 실험실에서 사용됩니다.
또한 의학, 생물 분석, 간호 또는 세포 기술과 같은 건강 과학 분야의 학생들에게 이러한 형태 적 구조를 보여주기 위해 실험실에서 사용됩니다.
캡슐 얼룩으로 얼룩진 Klebsiella pneumoniae 얼룩. safranin을 사용한 인도 잉크 방법. 출처 : А.А.В
캡슐을 소유 한 미생물에서 캡슐의 존재를 입증하는 몇 가지 간단한 기술이 있습니다. 네거티브 스테인, 앤서니 스테인 및 이전 두 가지를 결합한 변종입니다.
음성 염색은 주로 효모 크립토 코 쿠스 네오 포르 만 스의 존재가 의심 될 때 CSF 샘플에서 사용됩니다. 이 효모는 수막염의 일반적인 원인입니다.
이 기술은 니그로 신 또는 인도 잉크를 사용하며 조제의 배경과 미생물의 침투 할 수없는 캡슐 사이에 대비를 만드는 데 기반을두고 있습니다. 배경이 어두워지고 캡슐이 무색입니다. 이런 식으로이 구조가 드러납니다.
안토니 기술에 관해서는 Klebsiella pneumoniae, Streptococcus pneumoniae 및 Neisseria meningitidis와 같은 박테리아의 다당류 구조를 입증하기 위해 실험실에서 주로 사용한다고 말할 수 있습니다.
진단 목적으로이 기술을 사용하는 경우는 매우 드뭅니다. 이러한 미생물을 식별 할 수있는 다른 일상적인 검사가 있기 때문입니다.
기초
캡슐은 다당류 성질의 강한 구조입니다. 이것은 식균 작용으로부터 미생물을 보호하므로 침투하기 어려운 구조입니다.
이것이 캡슐 얼룩이 대조를 기반으로하는 이유입니다. 착색제는 조제 물의 바닥을 염색하는 반면 캡슐은 무색으로 유지됩니다.
따라서 이러한 기술을 사용하면 캡슐을 쉽게 인식 할 수 있습니다. 미생물에 캡슐이 없으면 모든 것이 같은 색으로 염색되기 때문에 이러한 유형의 착색으로 구별되지 않습니다.
캡슐을 착색하는 데 사용되는 모든 기술은 다른 염료와 절차를 사용 함에도 불구하고 동일한 근거를 가지고 있습니다.
기술 파
-Anthony 얼룩
Anthony의 얼룩은 크리스탈 바이올렛을 얼룩으로 사용합니다. 이것은 세균의 몸과 배경을 보라색으로 물들 일 것입니다.
한편, 20 % 황산구리가 사용됩니다. 이것은 세척액 역할을합니다. 즉, 조제 물에서 과도한 보라색 결정을 제거하여 캡슐을 맑게하지만 세균 체나 배경이 색을 잃지 않도록합니다.
기재
-무지개 빛깔의 우유.
- 미끄러지 다.
-1 % 바이올렛 크리스탈.
-20 % 황산구리.
-광학 현미경.
-침지 오일.
방법
이 기술은 다음으로 구성됩니다.
- 36 시간 동안 무지개 빛깔의 우유에서 미생물을 배양합니다.
- 슬라이드 끝에 문화 한 방울을 놓고 그 옆에 보라색 유리 한 방울을 놓고 혼합하고 다른 슬라이드의 끝과 함께 펼칩니다.
- 자연 건조하고 열을 가하지 마십시오.
- 20 % 황산구리 용액으로 세척하고 자연 건조시킵니다.
- 침지 대물 렌즈로 현미경으로 관찰합니다. 스프레드 끝쪽으로 검색하십시오.
캡슐을 손상 시키므로 열을 사용하여 고정하거나 건조하지 않는 것이 중요합니다. 또한 물로 씻지 마십시오.
해석
무지개 빛깔의 우유는 미생물이 눈에 띄는 캡슐을 개발하는 데 필요한 영양소를 제공하므로 우수한 배양 배지입니다.
반면에 무지개 빛깔의 우유는 두껍고 콤팩트 한 바닥을 형성하여 세균 체와 함께 보라색으로 물들지 만 미생물을 둘러싸고있는 캡슐은 무색으로 남아 있습니다. 따라서 박테리아 몸 주위에 명확한 후광이 관찰됩니다.
Anthony 's stain으로 염색 된 Klebsiella pneumoniae 얼룩의 현미경 관찰에 대한 그래픽 표현. 출처 : 저자 MSc. Marielsa Gil.
이점
수행하는 간단한 기술입니다. 고칠 필요가 없습니다.
또한 다른 배양 배지를 사용할 수 있지만,보다 두드러진 캡슐을 제공하는 이점이 있기 때문에 우유 배지가 선호된다는 점에 유의해야합니다.
단점
네거티브 염색보다 약간 더 노동 집약적 인 기술이며 시각화는 준비가 완전히 마를 때까지 기다려야합니다.
-네거티브 염색
기재
-슬라이드 슬라이드.
-미생물 배양액.
-중국 잉크 또는 니그로 신.
-광학 현미경.
-생리 식염수.
방법
커버 슬립에 생리 식염수 한 방울을 놓고 미생물 배양의 작은 부분을 용해시킵니다. 프렙이 너무 두껍지 않은 것이 중요합니다. 그런 다음 중국 잉크 또는 니그로 신 한 방울을 넣고 섞습니다.
그런 다음 액체가 넘치지 않고 커버 슬립 시트를 프렙 위에 놓습니다. 먼저 10X 대물 렌즈에 초점을 맞춘 다음 40X로 이동하여 현미경으로 관찰됩니다.
이 기술은 CSF 샘플에서 직접 사용할 수도 있습니다. 즉, 미생물 배양 한 방울을 배치하는 대신 CSF 한 방울을 배치합니다.
이점
수행하는 간단한 방법이며 동시에 저렴합니다. 준비물을 고정하거나 건조 할 필요가 없습니다.
단점
단점은 준비물이 마르기 전에 현미경으로 관찰해야한다는 것입니다. 왜냐하면 이런 일이 발생하면 미생물이 수축하여 시각화가 어려워지기 때문입니다.
반면 백혈구는 종종 효모와 혼동되기 때문에 분석가가 경험이 없으면 위양성이 발생할 수 있습니다.
중국 잉크 또는 니그로 신 기법으로 효모 캡슐을 관찰하는 것은 배양과 함께 입증 될 때까지 크립토 코커스 네오 포르 만 스의 추정 진단으로 간주되어야합니다.
이것은 수막염의 원인이 될 수있는 다른 효모가있을 수 있으며, 다른 종류의 크립토 코 쿠스뿐만 아니라 칸디다와로도 토룰라 속의 크립토 코 쿠스 네오 포르 만 스뿐만 아니라 수막염의 원인이 될 수 있기 때문입니다.
해석
캡슐화 된 미생물이있는 경우 액체에 투명한 물체가 떠있는 어두운 배경이 관찰되어 캡슐의 존재를 강조합니다.
중국 잉크로 염색 된 크립토 코 쿠스 네오 포르 만 스 캡슐. 출처 : 사진 출처 : 콘텐츠 제공자 (들) : CDC / Dr. Leanor 헤일리
-인도 잉크 기법
이 기술은 니그로 신으로도 할 수 있습니다. 이전에 설명한 기술의 조합입니다. 이 기술은 크리스탈 바이올렛과 인디언 잉크 또는 니그로 신을 사용합니다.
박테리아 몸은 음전하를 띠기 때문에 크리스탈 바이올렛에서 보라색으로 변하는 반면, 니그로 신은 얼룩의 바닥을 채색합니다. 박테리아에 캡슐이 있으면 미생물 주위에 투명한 후광으로 나타납니다.
크리스탈 바이올렛은 safranin, basic fuchsin 또는 methylene blue 중 하나로 대체 할 수 있습니다.
기재
-보라색 유리.
-니그로 신 또는 인도 잉크.
-슬라이드 슬라이드.
-현미경.
방법
-배지에서 미생물을 배양합니다.
-슬라이드 끝에 문화 한 방울을 놓고 그 옆에 인도 잉크 또는 니그로 신 결정 한 방울을 놓고 다른 슬라이드 끝과 섞어서 펼칩니다.
-자연 건조하고 열에 고정하지 마십시오.
-보라색 크리스탈 용액으로 1 분간 덮고 증류수로 매우 섬세하게 (부드러운 분사) 씻은 다음 야외에서 건조시킵니다.
-침지 대물 렌즈로 현미경으로 관찰합니다. 스프레드 끝쪽으로 검색하십시오.
해석
보라색 세균 체와 어두운 배경이 보입니다. 캡슐이 있으면 박테리아 주변에 무색으로 보입니다.
참고 문헌
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