도말 검사는 활동성 폐결핵의 진단 도구입니다. Mycobacterium tuberculosis와 같은 항산 균을 검출 및 측정 할 수있는 실험실 기술입니다. 이것은 지역 사회에서 활동성 폐결핵을 진단하고 치료의 이점을 평가하기 위해 전 세계적으로 가장 널리 사용되는 방법입니다.
폐결핵은 폐를 감염 시키지만 다른 기관 및 시스템에 영향을 미칠 수있는 결핵균에 의해 발생하는 감염성 질환입니다. 전 세계적으로 600 만 명 이상의 사람들이 폐결핵 (TB)으로 고통 받고 있습니다.
객담 도말에서 M. 결핵 세포 (출처 : Microrao / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0) via Wikimedia Commons)
Mycobacterium tuberculosis 및 기타 비 결핵성 Mycobacterium 종은 염기성 염료로 염색 한 후 산성 알코올 변색에 저항하는 mycolic acid가 풍부한 세포벽에 지질 코팅을 가지고 있습니다.
따라서 Ziehl-Neelsen 방법과 같은 특수 염색 방법이 사용됩니다. 이러한 간단하고 저렴한 방법을 사용하면 샘플을 산성 용액으로 헹구면 벽이 얼룩을 유지할 수 있으며 Mycobacterium 벽은 파란색으로 변하는 다른 박테리아와 달리 빨간색으로 변합니다.
도말 현미경 검사를 수행하려면 가래 검체가 필요하며, 아침에 일어나면 가급적이면 채취합니다. 조직 샘플 또는 체액 샘플도 사용할 수 있습니다.
방법
도말 현미경 검사를 위해 처리 할 샘플은 객담 샘플, 조직 샘플 또는 체액 샘플입니다. 조직 샘플은 기관 지경 검사 또는 림프절 또는 기타 조직의 생검으로 추출 할 수 있습니다.
결핵은 모든 기관이나 시스템에 영향을 미칠 수 있으므로 샘플은 소변 샘플, 뇌척수액, 흉막액, 복수 액, 혈액, 열린 구멍의 고름, 생검을 포함하여 매우 다양 할 수 있습니다. 등
폐외 병변 표본도 배양을 위해 처리되어야합니다. 가래 샘플은 상승 후 아침 시간에 수집됩니다.
여러 샘플을 연속 또는 연속으로 수집 할 수 있습니다. 샘플은 입이 넓은 병에 라벨을 부착해야합니다. 환자의 데이터, 샘플 유형 및 샘플 수집 날짜가 있어야합니다.
기술 절차
-시료가 확보되면 원심 분리하여 농축하거나 직접 사용할 수 있습니다. 초기 절차는 샘플 몇 방울을 놓고 슬라이드에 펴는 것으로 구성됩니다.
-샘플을 여과 된 푹신 (염색 용액)으로 덮습니다.
-그런 다음 약 3 개의 희끄무레 한 증기가 방출 될 때까지 가열합니다.
-샘플이 식을 때까지 5 분간 기다린 후 물로 씻습니다.
-표백 액 (산성 알코올)으로 2 분 동안 덮습니다.
-다시 물로 씻는다.
-샘플을 메틸렌 블루로 덮고 1 분간 방치합니다.
-물로 씻어냅니다.
-공기 중에서 건조시키고 현미경 관찰을 진행합니다.
현미경 사진 (www.pixabay.com에서 Konstantin Kolosov의 이미지)
이 절차는 빠르고 간단하며 저렴하며 Mycobacterium tuberculosis 세포가 붉게 물들도록합니다. 이 기술을 Ziehl-Neelsen 염색 기술이라고합니다.
현미경 관찰은 항 산성 간균의 존재를 확인하고 필드 별 정량화로 구성됩니다.
Mycobacterium tuberculosis 세포는 파란색 배경에 빨간색의 과립 모양의 곡선 막대로 나타납니다. 분리, 쌍 또는 그룹화 할 수 있습니다. 관찰은 현장별로 이루어져야하며 각 도말에 대해 최소 100 개의 현장을 검사해야합니다.
결과는 각 분야에 10 개 이상의 M. tuberculosis 세포가있을 때 양성으로 간주됩니다. 이는 샘플 1 밀리 리터당 5,000 ~ 100,000 개의 간균에 해당합니다.
이 경우 결핵성 미코 박테 리움 또는 기타 내산성 세균은 형태가 다르고 일반적으로 필드 당 관찰되는 양이 10 미만이기 때문에 결핵균에 양성으로 간주됩니다.
검체를 검사하는 사람은 결과에 위음성 또는 위양성이 존재할 수 있으므로 이러한 미생물의 탐지 및 인식에 대한 경험이나 전문 지식이 있어야합니다.
더 민감하지만 훨씬 더 비싼 다른 형광 투시 기술이 있습니다. 이러한 기술 중 하나는 Auramine-O 염색을 사용하여 녹색 형광을 얻거나 Auramine O / Rhodamine B 염색을 사용하여 노란색 / 주황색 형광을 관찰합니다.
양성 사례는 일반적으로 진단 및 적절한 치료 선택을 확인하기 위해 배양 및 항생제에 대해 수행됩니다.
도말 현미경이란 무엇입니까?
결핵은 폐 및 기타 신체 기관 및 기관 시스템에 영향을 미치는 전염병입니다. 호흡기에 심각한 부상을 입히는 전염성 질환으로 적절하게 치료하지 않으면 환자가 사망 할 수 있습니다.
결핵은 폐결핵에 감염된 환자의 객담에서 공기 중에 떠있는 물방울을 통해 거의 전염됩니다. 이 작은 물방울은 공기 중에 남아있을 수 있으며 흡입하는 사람을 감염시킬 수 있습니다.
M. 결핵 세포 (출처 : NIAID / CC BY (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0) via Wikimedia Commons)
감염은 환기가 잘되지 않는 환경에서 지속적으로 간균을 뱉는 감염된 환자와 장기간의 접촉 시간이 필요합니다. 면역 결핍이있는 사람들은 감염 될 가능성이 더 높습니다.
HIV 양성 환자는 나머지 인구보다 폐결핵을 포함한 심각한 호흡기 감염을 일으킬 가능성이 높습니다. 따라서 신속하고 저렴한 결핵 진단 방법으로서 도말 현미경 검사의 중요성이 강조됩니다.
스미어 현미경으로 결핵을 세균 학적으로 진단 할 수 있지만, 다른 연구에서 양성 결과를 확인해야합니다.
결핵 진단을 확인하는 연구에는 폐 상부 엽의 특징적인 영상을 보여주는 방사선 검사, 투베르쿨린 검사 양성, 샘플 배양 양성이 포함됩니다.
부정적 얼룩
특히 검체가 가래 인 경우 간균 제거가 일정하지 않기 때문에 음성 도말 현미경 검사가 반드시 결핵 진단을 배제하는 것은 아닙니다. 따라서 이러한 경우 진단이 의심되는 경우 일련의 샘플이 필요합니다.
긍정적 인 얼룩
양성 도말 현미경 검사는 결핵을 나타내며 다른 보완 연구를 통해 확인되어야합니다. 결과가 양성이면 배양 및 항생제 검사를 수행해야합니다.
일단 치료가 확립되면, 부정적인 결과를 얻을 때까지 도말 현미경의 양성 척도를 지속적으로 감소 시키면 치료의 이점을 조절할 수 있습니다.
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