스튜어트 미디엄 : 기초, 준비 ​​및 사용 - 생물학 - 2025

매체 스튜어트 생체 시료의 운반에 사용되는 영양분이없는 반고체 한천이나 국물이다. 그것의 목적은 샘플에 존재하는 균주를 특정 시간 동안 생존 가능하게 유지하지만 미생물 개체수를 늘리지 않는 것입니다.

1948 년 Moffet, Young, Stuart가 만들었고 나중에 Toshach와 Patsula가 수정했습니다. 글리세로 인산 나트륨, 티오 글리콜 산 나트륨, 염화칼슘 및 한천으로 구성됩니다. 후자는 반고체 매체에 존재하며 액체에는 없습니다. 일부 실험실에서는 메틸렌 블루를 추가합니다.

스튜어트 교통 수단을 갖춘 Culturette. 출처 : 작성자 : CDC / Dr. Gilda Jones, 제공 : 공중 보건 이미지 라이브러리

그들은 일반적으로 샘플을 즉시 파종 할 수 없을 때 사용됩니다. 이 경우 샘플은 운송 매체에 배치되고 배양을 처리 할 실험실로 전송됩니다.

이러한 방식으로, 존재하는 미생물이 해당 배양 배지에 접종 될 때까지 살아남는 것이 보장됩니다.

처음에는 임질균의 존재가 의심되는 요도 또는 질 샘플을 수송하기위한 용도로 사용되었습니다. 나중에 그들은 그 유용성이 더 넓을 수 있다는 것을 깨달았습니다.

Stuart 배지는 Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis 등과 같은 불안정하고 까다로운 미생물의 보존에 매우 효율적인 것으로 밝혀졌습니다. Enterobacteria와 같은 다른 비 성가신 미생물 외에도.

Stuart 배지는 기본적으로 샘플의 건조를 방지하고 삼투압 균형을 유지하며 미생물을 이상적인 pH로 보존합니다. 반면 전략적으로이 배지는 영양분을 포함하지 않기 때문에 미생물 번식을 방지합니다.

시장에는 배양액이라고하는이 운송 수단 또는 기타 운송 수단을 포함하는 특수 샘플 운송 장치가 있습니다. 그들은 또한 실험실에서 준비 할 수 있습니다.

기초

Stuart 운송 모드의 목적은 처리 될 때까지 샘플을 원래 상태에 가깝게 유지하는 것입니다.

글리세로 인산 나트륨과 염화칼슘은 pH와 삼투압을 유지하여 작용하는 완충 시스템입니다.

한편, 나트륨 티오 글리콜 레이트는 환원제 역할을하며 한천을 포함하는 경우 배지의 산소화를 지연시키기 위해 반고체 농도를 부여합니다. 마지막으로 메틸렌 블루는 산화 표시기, 즉 산소의 존재를 감지합니다.

산화 환원 지시약이있는 반고체 배지는 혐기성 박테리아의 존재가 의심되는 샘플 운반에 이상적입니다.

운송 수단의 특성

모든 교통 수단과 마찬가지로 Stuart 매체는 다음과 같은 특정 특성을 충족합니다.

-번식하지 않고 존재하는 생존 가능한 미생물 균주를 유지합니다.

-영양소를 포함하지 않습니다; 그 화합물은 적절한 pH 및 삼투압 조건에서 샘플을 수화시키는 것을 목표로합니다.

-폐렴 구균과 같은 일부 섬세한 미생물의자가 분해를 억제합니다.

-사용은 일시적이며 너무 오래 사용하지 마십시오.

예비

산화 환원 표시기가있는 반고체 Stuart 배지

가정 준비

성분

글리세로 인산 나트륨 10 gr

티오 글리콜 산 나트륨 1.0 gr

염화칼슘 0.1 gr

메틸렌 블루 0.002 gr

한천 3 gr

증류수 1L

구성 요소를 혼합하고 완전히 녹을 때까지 가열하십시오. 튜브 또는 특수 면봉에 붓습니다. 이들은 오토 클레이브에 도입되고 121ºC에서 15 분 동안 멸균됩니다. 튜브를 수직 위치 (블록 모양)에서 식 힙니다. 실온에서 보관하십시오.

상업적 매체로 준비

증류수 1 리터에 배지 14.1g의 무게를 잰다. 완전히 녹을 때까지 자주 열을 흔들어 끓일 수 있습니다. 이미 설명한 나머지 절차입니다.

탈수 된 배지는 크림색이며 표면이 파란색이어야합니다. 이것은 메틸렌 블루의 존재 때문입니다.

배지의 pH는 7.4 ± 0.2로 조정되어야합니다.

Liquid Modified Stuart Medium (수제)

성분

글리세로 인산 나트륨 10 gr

티오 글리콜 산 나트륨 1 gr

염화칼슘 이수화 물 0.1 gr

증류수 1000ml

반고체와 같은 성분이지만 한천이나 메틸렌 블루가 없습니다. 이 경우 구성 요소는 가열하지 않고 혼합되고 0.5ml는 나사 캡이 달린 16 x 125mm 튜브에 배포됩니다.

10 분 동안 121 ° C의 오토 클레이브에서 멸균됩니다. 샘플링의 경우 샘플이 PCR 용인 경우 dacron 면봉을 사용하고 배양 용인 경우 레이온을 사용해야합니다.

튜브는 실온에서 보관됩니다.

응용

상업적으로 culturette라고하는 특수 시료 운반 장치가 있습니다. 이 장치는 내부에 면봉이있는 가늘고 얇은 튜브이며 끝에는 반고체 또는 액체 Stuart 매체가 포함 된 세그먼트가 있습니다.

장치를 열고 면봉으로 샘플을 채취합니다. 그런 다음 면봉의 끝이 반고체 운송 매체에 삽입 될 때까지 튜브에 다시 삽입됩니다. 일부는 액체 스튜어트 배지가 함침 된 폴리 우레탄 스폰지를 가져 와서 샘플이 젖어있을 때 보존됩니다.

섬세한 미생물이 의심되는 경우에는 목탄 면봉을 사용하여 시료를 채취해야합니다.

면봉 또는 면봉으로 채취하여이 배지로 옮길 수있는 샘플은 인두 삼출물, 직장 면봉 및 질, 요도, 상처, 안구, 귀 및 농양을 포함한 다양한 분비물입니다.

운반 매체의 샘플을 실험실로 옮기는 동안 매체를 극한 환경 조건 (너무 차갑거나 너무 뜨겁게)에 노출시키는 것은 피해야합니다. 대기압의 갑작스러운 변화도 피해야합니다.

배지가 미생물을 생존 할 수있는 시간은 문제의 균주에 따라 다릅니다. 예를 들어, Neisserias 및 Haemophilus 속 미생물의 경우 최대 24 시간 동안 생존 할 수 있지만 Salmonella 또는 Shigella와 같은 균주는 며칠 또는 몇 주 동안 지속될 수 있습니다.

시료 처리에 4 일 이상 걸릴 수 있다고 판단되는 경우 -70 ° C에서 시료를 동결하는 것이 좋습니다.

운송 수단에서 샘플 식별

준비된 운송 수단 또는 상업용 배양 물에는 다음 정보가있는 라벨이 있어야합니다.

환자의 이름과 성 : 샘플 혼동을 방지합니다.

식별 번호 : 직장에서 주문을 보관하는 것이 편리합니다.

샘플 수집 소스 : 세균학자가 적절한 배양 배지를 선택할 수 있도록 도와줍니다.

담당 의사 : 때때로 가능한 상담이 필요합니다.

샘플 수집 날짜 및 시간 : 샘플 수집 과 검사실에서의 접수 사이의 경과 시간에 따라 샘플의 수락 또는 거부가 필요합니다.

첨부하는 데 매우 유용한 기타 정보는 다음과 같습니다.

추정 진단 : 의심 진단에 따라 특수 배양 배지 추가를 안내합니다.

항생제 치료 : 항생제에 첨부 하는 것이 유용합니다.

이 모든 정보는 적절한 샘플 처리를 보장하는 데 중요합니다.

QA

Stuart 배지의 성능을 평가하기 위해 알려진 균주를 접종하고 25 ° C에서 보관할 수 있습니다. 예 : Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.

모든 경우에 24 시간 동안 보존 된 문제의 미생물을 회수 할 것으로 예상됩니다.

다른 한편으로, 다른 균주, 예를 들면 : Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 및 Escherichia coli ATCC 11775가 사용될 수 있습니다.

모든 경우에 최대 96 시간 동안 풍부한 회복이 예상됩니다.

한계

일부 연구에서는 Stuart 배지에 존재하는 글리세로 포스페이트가 다른 그람 음성 박테리아 중에서 일부 대장균에 의해 대사 될 수 있으므로이 배지에서 증식 할 수 있음을 확인합니다.

이 위험은 샘플 처리가 더 오래 지연 될수록 증가합니다. 마찬가지로, 운송 중 Stuart 매체가 고온에 노출되면 이에 영향을 미칩니다.

참고 문헌

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