문화 미디어 준비 : 목표 및 단계 - 생물학 - 2025

배양 배지 의 준비는 원하는 미생물의 성장을 위해 실험실에서 사용되는 일상적인 방법입니다. 배양 배지는 미생물 개체군의 발달에 필요한 모든 영양소를 포함하는 고체, 액체 또는 반고체 제제입니다.

일반적으로 미생물을 배양하는 수단은 단백질과 아미노산이 풍부하며 일반적으로 비타민, 혈액, 혈청 등과 같이 연구 할 유기체의 성장에 유리한 일부 성분을 포함합니다.

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그 구성은 관심 미생물의 필요에 따라 다르기 때문에 일반적이거나 보편적 인 배양 배지는 없습니다. 일부 박테리아는 모든 배양 배지에서 자랄 수 있지만 다른 박테리아에는 특별한 요구 사항이 있습니다.

무엇으로 구성되어 있습니까?

곰팡이와 박테리아와 같은 미생물은 크기가 작기 때문에 개별적으로 연구 할 수 없습니다. 이러한 이유로, 그들은 인구의 상당한 증가를 허용하는 인위적인 수단으로 재배되어야합니다.

예를 들어, 박테리아를 연구하려면 박테리아가 증식하고 식민지를 형성 할 수 있도록 적절한 조건을 제공해야합니다 (육안으로 관찰 할 수 있음).

배양액의 준비는 배양 할 미생물의 종류에 따라 크게 다릅니다. 그것을 준비하기 전에 작업 유기체의 기본 영양 요구 사항을 알아야합니다.

배양 배지에 사용되는 가장 일반적인 구성 요소는 준비에 대한 일반적인 아이디어를 얻기 위해 아래에 설명되어 있습니다.

한천

겔화 제로 배양에 사용되며 고체 또는 반고체 배지를 찾을 때 추가됩니다. 배지 제조에 사용 된 최초의 응고제는 젤라틴 이었지만 1883 년 W. Hesse에 의해 한천이 세균학 세계에 도입되었습니다.

박테리아 한천은 조류에서 추출한 복잡한 가지를 가진 다당류를 주성분으로합니다. 이 화합물은 아이스크림 및 잼과 같은 일반적인 식품의 증점제로 사용됩니다.

여러 가지 이유로 미생물학에서 매우 귀중한 요소입니다. 주로 미생물이 분해 할 수 없기 때문에 100 ° C의 온도에서 액화하고 45 ° C 이하가 될 때까지 액체 상태를 유지합니다.

고체 배지를 준비하고자하는 경우 한천 농도는 약 1.5 %, 반고체는 0.3 ~ 0.5 %로 준비해야합니다.

유체

병원성 유기체의 재배에는 자연 환경에서와 같이 성장할 수 있도록 체액이 필요합니다. 이러한 이유로 전혈 또는 제세동 혈액이 추가됩니다. 액체는 건강한 동물에서 채취 한 후 멸균되면 배양 배지에 추가됩니다.

발췌

그들은 다른 동물 부위 (예 : 고기 또는 간) 또는 야채 (씨앗)에서 얻어지며 페이스트 또는 분말 형태의 고체 농축 물을 얻기 위해 가공됩니다. 가장 흔한 것은 효모, 맥아 및 고기입니다.

펩톤

이러한 유기 화합물은 동물 또는 식물 조직의 효소 또는 화학적 가수 분해에 의해 얻어집니다. 목적은 단백질의 기본 단위 인 아미노산이 풍부한 함량을 추가하는 것입니다.

충격 흡수제

"버퍼"또는 버퍼 시스템은 갑작스런 pH 변화를 방지하고 신체가 견딜 수있는 최적의 범위를 유지하는 데 도움이됩니다.

일부 박테리아는 알칼리성 배지를 선호하지만 대부분의 유기체는 pH 7에서 잘 자랄 수 있습니다. 그러나 6과 9의 값 사이의 pH 변화에 저항하는 박테리아가 있습니다.

pH에 민감한 종에서는 과도한 양의 수소 또는 하이드 록실 이온이 아니라 세포를 관통 할 수있는 약산이나 염기의 증가로 인해 손상이 발생합니다.

마찬가지로 pH 지표를 추가하여이를 모니터링하고 발효 또는 기타 공정으로 인한 편차를 방지합니다.

목표

배양 배지를 준비 할 때의 주요 목적은 유기체의 성공적인 발달을 위해 필요한 모든 구성 요소를 추가하는 것입니다. 원하는 배지를 얻기위한 가장 효과적인 성분 및 영양소 조합을 식별해야합니다.

배지의 구성과 영양소의 가용성은 이러한 단계에 따라 달라지기 때문에 배지의 준비 및 저장은 성공적인 성장을 보장하는 데 중요합니다.

미생물의 배양은 수광 강도, 온도 및 배지의 산성도 또는 알칼리도와 같은 배양 배지 외부의 여러 요인에 의해 영향을받는 작업이라는 점을 고려해야합니다. 따라서 이러한 각 변수를 고려해야합니다.

미디어 유형

구성에 따라

구성에 따라 자연 또는 경험적, 반합성 및 정의 된 합성 또는 화학적 매체의 세 가지 주요 유형의 작물이 있습니다.

자연 환 ​​경

자연 환경에서는 정확한 구성을 알 수 없습니다. 여기에는 우유, 희석 된 혈액, 야채 주스, 육류 및 펩톤의 추출물 및 주입과 같은 성분이 포함됩니다. 경제적 인 이유로 콩 추출물, 유청, 당밀 등과 같은 값싼 성분이 종종 추가됩니다.

반합성 매체

구성이 부분적으로 알려진 경우 반합성 매체라고합니다. 한천을 포함하는 모든 배지는 반합성 배지가됩니다.

그중에는 감자 덱 스트로스 한천, czapek-dox 한천, 귀리 한천, 고기 펩톤 한천 등이 있습니다.

합성 또는 화학적 정의 매체

이 경우 탄소, 질소, 황, 인 및 기타 필요한 성장 인자의 공급원과 관련하여 매체의 구성이 완전히 알려져 있습니다. 다른 연구자들을 위해 재현 가능한 결과를 얻고 자 할 때 매우 유용합니다.

소위 "특별한 성장 요구 사항을 가진 미생물"의 경우 필요한 구성 요소를 추가해야합니다. 이 유형의 예는 Lactobacillus입니다.

미생물 유형에 따라

마찬가지로, 배양 할 수있는 미생물의 유형에 따라 배지에 대한 또 다른 분류가 있습니다. 이 원칙에 따라 다음과 같은 일반, 강화, 선택 및 차별 수단이 있습니다. 각각은 아래에 설명되어 있습니다.

일반 미디어

이들은 다양한 미생물의 발달을 지원합니다. 어떤 유기체가 성장을 위해 특별한 조건을 필요로한다면 이러한 유형의 배양에서 성공적으로 성장할 수 없습니다.

강화 미디어

농축 배지는 특정 유형의 미생물의 성장을 지원하지만 다른 유형의 미생물이 성장하는 것을 방지하는 물질이 추가되지 않았습니다.

선택적 미디어

그들은 미생물의 특정 성장을 찾고 곰팡이, 박테리아, 원생 동물이라고 부릅니다. 이를 위해 다른 사람의 발달을 억제합니다.

이 목적을 달성하기 위해 광범위한 미생물 그룹에 치명적이고 관심있는 유기체에 무해한 화합물을 추가하거나 표적 미생물에 의해서만 동화 될 수있는 에너지 원을 추가 할 수 있습니다.

병원성 미생물을 배양하기 위해 의료 샘플을 채취 할 때 선택적 배지가 사용됩니다. 여기서 병원균의 성장을 촉진하고 환자의 정상적인 미생물 식물의 발달을 억제하는 것이 필요합니다.

예를 들어 Bismuth sulfite agar는 그람 양성 박테리아와 위장관에서 발견되는 많은 박테리아의 성장을 허용하지 않습니다. 이러한 이유로 장티푸스를 유발하는 그람 음성균 인 Salmonella typhi를 분변 샘플에서 배양하는 데 사용됩니다.

차동 매체

이 유형은 관심있는 유기체의 일부 진단 적 특성 (예 : 신진 대사 특성)을 사용하여 동일한 환경에서 자라는 다른 종에 대해 식별 할 수 있습니다.

차별 매체와 선택적 매체는 모두 임상 미생물학 및 공중 보건 분야에서 매우 유용합니다. 이러한 분야는 병리 또는 열악한 위생 조건과 관련된 특정 미생물의 존재를 감지해야하기 때문입니다.

원하는 식민지에 독특한 특성을 부여하는 지표 물질을 배양에 추가 할 수 있습니다. 예를 들어, 한천-에오신-메틸렌 블루 (약칭 EMB)와 MacConkey 한천에 유당과 pH 지시약을 첨가합니다.

따라서 이러한 배지에서 유당을 발효하고 알데히드를 생성하는 능력을 가진 콜로니가 발생하면 특별한 색상으로 관찰 할 수 있습니다.

단계

현재 배양액은 동결 건조 형태로 구입할 수 있습니다. 따라서 준비가 더 쉽고 남은 것은 제품을 재수 화하는 것입니다. 내용물은 제품의 모든 표시에 따라 무게를 재고 (준비 할 최종 양을 고려하여) 증류수에 용해시켜야합니다.

액체 배지의 내용물은 후속 멸균을 위해 원하는 용기 (페트리 접시, 튜브 등)로 나누어야합니다. 고체 매체를 분배하려면 전자 레인지를 사용하여 녹이거나 재료를 수조에 두어야합니다. 배지의 pH를 조정해야합니다.

일반적으로 한천은 시험관이나 페트리 접시에 사용됩니다. 한천이 최종 말단 가장자리가 대각선이되도록 적절한 각도로 기울어 진 위치에서 굳어지면이 배열을 부리 또는 경사 튜브라고합니다. 한천이 완전히 수직 위치에서 굳어지면 "깊은"이라고합니다.

미디어를 멸균 한 후-오토 클레이브를 사용하여 냉각 할 수 있습니다. 이것들은 미생물이없는 환경에서 처리되어야하며, 가장 일반적인 것은 주변에 무균 환경을 보장하는 조명 라이터로 작업하는 것입니다.

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